2014 Fiscal Year Research-status Report
頭頸部癌に対するヒト乳頭腫ウイルス遺伝子を標的とした集学的治療の開発
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25462683
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| Research Institution | Kobe University |
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Principal Investigator |
大月 直樹 神戸大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (40343264)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
丹生 健一 神戸大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (20251283)
白川 利朗 神戸大学, 保健学研究科, 教授 (70335446)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | ヒト乳頭腫ウイルス / 頭頸部癌 / アデノウイルスベクター / 遺伝子治療 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
これまで頭頸部癌に対しては手術療法、放射線療法、化学療法を組み合わせた様々な集学的治療、分子標的薬による治療が試みられてきた。しかし、進行癌における生存率は未だに約50％前後で満足できる成果があげられていない。手術療法では根治が望めるものの、整容面はもちろん嚥下、発声障害など様々な機能的障害をきたしQOLの低下は避けられない。化学放射線療法においては嚥下障害や唾液分泌障害などの後遺症が問題視されている。抗EGFR抗体などの分子標的薬においては腫瘍特異的でないことから正常組織障害による副作用が必発であり、効果的かつ低侵襲な新たな治療法の開発が望まれている。
これまで我々は、HPV16陽性頭頸部癌細胞株にin vitroでHPV癌遺伝子E6、E7に対するsiRNAを導入することによりpRbおよびp53の発現が回復し、結果として細胞増殖が抑制され、アポトーシスが誘導されることを示してきた。また、in vivo実験においてもE6、E7に対するsiRNAの腫瘍内投与により腫瘍増殖が有意に抑制され、E6とE7の両者を抑制するとその効果はさらに増強されることを示した。
今回の研究では、より効率的に遺伝子導入を行なうために、E6、E7遺伝子に対するアンチセンスRNAを組み込んだアデノウイルスベクターを作成して、HPV16陽性頭頸部癌細胞株に対するその細胞殺傷効果をin vitroで確認している。今年度はin vivo実験においてE7遺伝子に対するアンチセンスRNAを組み込んだアデノウイルスベクターを腫瘍細胞に導入することで、抗癌剤であるシスプラチン単独で投与するよりも、同時併用した方が腫瘍増殖抑制効果を増強することがわかった。
現在、in vitroの実験でシスプラチンの濃度の条件設定を変えて実験を行ない、腫瘍増殖抑制効果を確認している。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
すでに、昨年度はE7遺伝子に対するアンチセンスRNAを組み込んだアデノウイルスベクターを使用してHPV16陽性頭頸部癌細胞株に対するその細胞殺傷効果をin vitroで確認している。今年度はin vivo実験は既に終了し、E7遺伝子に対するアンチセンスRNAを組み込んだアデノウイルスベクターを腫瘍細胞移植マウスに投与し、腫瘍細胞内に遺伝子導入を行なうことに成功した。さらに、腫瘍細胞移植マウスに抗癌剤であるシスプラチン単独で投与するよりも、E7遺伝子に対するアンチセンスRNAを組み込んだアデノウイルスベクター投与を同時併用した方が高い腫瘍増殖抑制効果が得られるという結果を得ている。現在、摘出した腫瘍の免疫染色を行ない、p53およびpRbタンパクの発現について解析中である。
また、シスプラチンの濃度の変えてin vitro実験を行ない、腫瘍増殖抑制効果を確認している。
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| Strategy for Future Research Activity |
本研究は現在疫学的に増加傾向を示しているHPV16陽性頭頸部癌に対する治療を開発することを目的としており。より侵襲や副作用が少ないが、効果が得られる治療法が望まれる。よって、in vivo実験で得られた結果を詳細に検討して、HPV16陽性頭頸部癌に認められる癌遺伝子E6、E7の発現抑制によりシスプラチンの抗腫瘍効果を増強するメカニズムを解明するとともに、シスプラチン投与量について追加実験により検討したいと考えている。
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