肺胞上皮増殖因子遺伝子導入による肺保護戦略ー臨床応用へのアプローチー

2014 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 25462826
• Research Institution: Yokohama City University
• Principal Investigator: 馬場 靖子 横浜市立大学, 大学病院, 准教授 (80453041)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 倉橋 清泰 横浜市立大学, 大学病院, 准教授 (50234539) ; 矢澤 卓也 千葉大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (50251054)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2016-03-31
• Keywords: 集中治療

Outline of Annual Research Achievements

急性肺傷害へのKeratinocyte growth factor(KGF, FGF-7)投与は上皮細胞の損傷を軽減し、修復を促進する作用がある、以前から多くの肺傷害動物モデルへの投与でその有効性が示され、近年は、臨床研究も開始されている。
またmesenchymal stem cell(MSC)投与による肺傷害修復効果についても大きく取り上げられている。本研究ではMSCから生理的に分泌されて、肺傷害修復の一端を担っているKGFをウイルスベクターを使用して、MSCにKGF遺伝子導入し、MSCからKGFを過剰に分泌する状態をつくり、その効果を確認することが目的である。
今年度ウイルスベクターの発現確認マーカーとして、KGFとGFPが１分子ずつ発現するアデノウイルスベクターを作製した。生体内に投与した際に、外から投与したMSCの分布を明らかにすることができる。アデノウイルスベクターのcloning siteの内、E1領域にKGF(CAG promoter)、E4領域にGFP(EF promoter)遺伝子をいれた。コントロールベクターとして、KGF発現単位をもたない、GFPのみを発現するものを用いる。
ＭＳＣにアデノウイルスベクターを感染させ、KGF-GFPまたはGFP遺伝子を導入したMSCを作製する。今後マウス尾静脈からＭＳＣを投与し、KGFの傷害軽減効果について検討を加える予定である。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

アデノウイルスベクター作製に時間を要し、感染させたＭＳＣを動物に投与することができなかった。

Strategy for Future Research Activity

他者の論文で、ＭＳＣにＫＧＦ遺伝子導入し、肺傷害を軽減する研究が報告されたPLoS One. 2013 Dec 18;8(12)Keratinocyte growth factor gene delivery via mesenchymal stem cells protects against lipopolysaccharide-induced acute lung injury in mice. Chen J1 et al.ＬＰＳ誘導性肺傷害を軽減した内容であるが、ほかの肺傷害モデル（高濃度酸素肺傷害など）について研究してみる。

Causes of Carryover

昨年度動物実験までを予定していたが、ウイルスベクター作製に時間を要したため、その過程に進めなかったため

Expenditure Plan for Carryover Budget

ウイルスベクターを作製済みなので、動物に投与、生化学実験、病理学的実験等を進める。