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2014 Fiscal Year Research-status Report

歯周病細菌における病原タンパク質の菌体表面局在化機構の解明

Research Project

Project/Area Number 25462863
Research InstitutionNagasaki University

Principal Investigator

庄子 幹郎  長崎大学, 医歯薬学総合研究科 (歯学系), 助教 (10336175)

Project Period (FY) 2013-04-01 – 2016-03-31
Keywords歯周病細菌 / リポ多糖
Outline of Annual Research Achievements

歯周病細菌Porphyromonas gingivalisにてHG66株という黒色集落形成減弱株が報告されているが、その原因は不明であった。本菌はA-LPSとO-LPS というO抗原の組成が異なる2種類のLPSを持つと報告されており、HG66株はA-LPSの生合成に障害が起きていると考えられた。そこで、A-LPSの生合成に関わる遺伝子としてwbpB遺伝子をHG66株に導入すると黒色集落形成が相補された。シークエンス解析により、HG66株のwbpB遺伝子は240番目のグルタミンが終始コドンに変異していた。
wbpB遺伝子産物については、緑膿菌のB-band O抗原にある構成糖(ジアセチルマンノウロン酸)の生合成に関与することが報告されている。緑膿菌において、ジアセチルマンノウロン酸はWbpA, WbpB, WbpE, WbpD, WbpIというタンパク質により合成される。P. gingivalisにおける相同分子を調べた結果、WbpAホモログにUgdA(PGN_0613)およびPGN_1243、WbpBホモログにPGN_0168、WbpEホモログにPorR(PGN_1236)、WbpDホモログにPGN_0002、WbpIホモログはない、という事が分かった。これまでにPGN_0002は解析されていなかったことから、PGN_0002遺伝子変異株を作製したところ、その変異株はporR遺伝子変異株やwbpB遺伝子変異株と同様な性状を示した。したがって、P. gingivalisも緑膿菌が持つジアセチルマンノウロン酸の生合成に関与する遺伝子を持つものの最後のWbpIホモログはないことから、最終産物としてジアセチルグルクロン酸を合成し、A-LPSのO抗原に存在している可能性が示唆された。
本年度に実施したA-LPSの生合成機構の研究は本菌の病原機構に関与することから、更なる解析が必要である。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

本年度に得られた成果を論文発表および学会発表することができた。

Strategy for Future Research Activity

本年度の研究成果から、本菌のA-LPSのO抗原にジアセチルグルクロン酸が存在するか否かを明らかにするのが課題である。また、A-LPSが存在することにより、何故、本菌の病原因子であるCTD含有タンパク質が菌体表面に局在できるようになるのかについても不明であり、更なる解明が必要である

Causes of Carryover

歯周病細菌Porphyromonas gingialisには、O抗原の組成の異なる二種のLPSが存在すると報告されている。しかしながら、それらの二種を識別する抗体を用いた解析から、本当に二種類のO抗原が存在するかについては疑問が残るため、一旦、当初計画していた解析方法を中断し、購入予定だった試薬などの費用が未使用となった。

Expenditure Plan for Carryover Budget

歯周病細菌Porphyromonas gingivalisのO抗原合成に関わる遺伝子について、ゲノム解析より糖転移酵素をコードする遺伝子について、変異株の網羅的作製ならびに性状解析を行う。

  • Research Products

    (6 results)

All 2014 Other

All Journal Article (3 results) (of which Peer Reviewed: 3 results,  Open Access: 3 results,  Acknowledgement Compliant: 3 results) Presentation (2 results) Remarks (1 results)

  • [Journal Article] Involvement of the Wbp pathway in the biosynthesis of Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide with anionic polysaccharide.2014

    • Author(s)
      Shoji, M., Sato, K., Yukitake, H., Naito, M., Nakayama, K.
    • Journal Title

      Scientific Reports

      Volume: 4 Pages: 5056

    • DOI

      10.1038/srep05056.

    • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Analysis of a Lys-specific serine endopeptidase secreted via the type IX secretion system in Porphyromonas gingivalis.2014

    • Author(s)
      Nonaka, M., Shoji, M., Kadowaki, T., Sato, K., Yukitake, H., Naito, M., Nakayama, K.
    • Journal Title

      FEMS Microbiology Letters

      Volume: 354 Pages: 60-68

    • DOI

      10.1111/1574-6968.12426.

    • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Lack of a surface layer in Tannerella forsythia mutants deficient in the type IX secretion system.2014

    • Author(s)
      Narita, Y., Sato, K., Yukitake, H., Shoji, M., Daisuke, N., Nagano, K., Yoshimura, F., Naito, M., Nakayama, K.
    • Journal Title

      Microbiology-SGM

      Volume: 160 Pages: 2295-2303

    • DOI

      10.1099/mic.0.080192-0.

    • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
  • [Presentation] 歯周病細菌Porphyromonas gingivalisの黒色集落形成機構2014

    • Author(s)
      庄子幹郎, 佐藤啓子, 雪竹英治, 内藤真理子, 中山浩次
    • Organizer
      第46回九州微生物研究会総会
    • Place of Presentation
      ホテルセントラーザ博多(福岡市)
    • Year and Date
      2014-12-22 – 2014-12-22
  • [Presentation] Porphyromonas gingivalisにおける糖転移酵素の遺伝子変異株作製2014

    • Author(s)
      庄子幹郎, 佐藤啓子, 雪竹英治, 内藤真理子, 中山浩次
    • Organizer
      第67回日本細菌学会九州支部総会・第51回日本ウイルス学会九州支部総会
    • Place of Presentation
      城山ホテル(鹿児島市)
    • Year and Date
      2014-09-05 – 2014-09-06
  • [Remarks] 長崎大学歯学部 歯周病基盤研究センター

    • URL

      http://www.de.nagasaki-u.ac.jp/perio/

URL: 

Published: 2016-05-27  

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