2014 Fiscal Year Research-status Report
ラット歯周炎モデルの確立と骨形成薬剤による骨再生療法の研究
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25463070
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
波田野 典子 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (70396737)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
阿部 雅修 東京大学, 学内共同利用施設等, 講師 (10392333)
瀬戸 一郎 東京大学, 医学部附属病院, 講師 (30582390) [Withdrawn]
山本 健一 東京大学, 工学(系)研究科(研究院), 研究員 (90583162)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 骨再生 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、歯周炎による不可逆性骨欠損部の骨再生を目指し、骨形成性低分子化合物による歯槽骨再生を目的とする。昨年度から引き続き、骨形成性低分子化合物ヘリオキサンチン誘導体（TH）を(2-Hydroxypropyl)-β-cyclodextrin（CD）に包接させた溶液をヒドロキシプロピルセルロース（HPC）に含有させたゲルとし、そのTH含有ゲルの骨芽細胞分化誘導能および細胞毒性の検証および解析を行っている。マウス頭頂骨由来前骨芽細胞株MC3T3-E1細胞を用い、Real-time RT-PCRによりTH曝露4日目において骨芽細胞分化の中期の分化マーカーであるbone sialoprotain（Bsp）の上昇を認め、曝露7日目ではBspおよび後期の分化マーカーであるosteocalcin（Oc）の発現の上昇を認めた。細胞毒性に関してはMTTアッセイを行い、毒性は認めておらず、最適濃度の検討を進めている。また、8週齢オスのWistarラットの上顎第二臼歯に5-0黒絹糸を4週間巻くことで自然発症に近い歯周炎を発症するラット歯周炎モデルを作製し、放射線学的解析および組織学的解析を行っている。放射線学的解析はマイクロCT（inspeXio SMX- 90 CT 島津製作所）を用い、試験側全てにおいて骨欠損が生じていることを認めた。さらに、3次元的な画像解析も同時に行っている。組織学的解析は、脱灰骨薄切標本を用いて、 Hematoxylin Eosin 染色、Masson Trichrome 染色を行っている。今年度は、作製した歯周炎ラットモデルを用い、骨欠損を生じたところにTH含有ゲルを1～3μL投与する実験を行う予定としている。自然治癒経過と比較するため、絹糸除去後4週間目で評価する予定としている。骨欠損部の歯肉溝に鈍針でTH含有ゲルを投与する装置作製も含め検討を行っている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
今年度は学会発表や学会参加により、本研究を遂行するための情報や資料収集および見識を得ることができた。前年度に引き続き，研究分担者が1名退職したことに伴い、若干研究の遂行が遅くなったが、研究計画書に記載した実験は順次進めている。
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| Strategy for Future Research Activity |
今年度は学会発表や学会参加により、本研究を遂行するための情報や資料収集および見識を得ることができた。前年度に引き続き，研究分担者が1名退職したことに伴い、若干研究の遂行が遅くなったが、研究計画書に記載した実験は順次進めている。また，データ解析のためのパソコンおよびソフトウェアが必要であるが，使用しているパソコンやソフトウェアのアップデートの更新期限が切れることから，新しく購入する必要がある。
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| Causes of Carryover |
今年度は、研究を遂行するに当たり、前年度の繰り越し予算を使用しながら行ったが，今年度に入って研究分担者がさらに1名退職したため、若干研究の遂行に遅滞が生じた。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
来年度は研究計画書に記載しているとおり、今年度の実験内容である、動物実験の費用およびTH含有ゲルを投与するための実験器具の作製、マイクロアレイ解析をバイオマトリックス研究所に外注するなどの計上が必要となり、それに付随し、論文作成の費用も必要となるため、今年度の費用は十分消費され、順調に研究は遂行できると思われる。
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