2014 Fiscal Year Research-status Report

幼少期に身体抑制を経験したラットの成長後の中枢神経系、特に視床下部の機能

Research Project

Project/Area Number	25463160
Research Institution	Hokkaido University
Principal Investigator	吉原俊博北海道大学, 歯学研究科(研究院), 准教授 (60261319)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	大島昇平北海道大学, 大学病院, 講師 (00374546) 菊入崇北海道大学, 歯学研究科(研究院), 助教 (10322819) 高崎千尋北海道大学, 歯学研究科(研究院), 助教 (60451449)
Project Period (FY)	2013-04-01 – 2016-03-31
Keywords	身体抑制 / ストレス反応 / HPAaxis / ラット
Outline of Annual Research Achievements	本研究では、幼少期に身体抑制ストレスを経験したラットがどのように成長し、成長後のストレス反応のメカニズムや特徴を考察し、さらに生活リズム、摂食行動、生殖機能に関与する中枢神経系の機能を神経内分泌学的、分子生物学的手法などを用いて調べる。平成26年度の研究計画は以下の通りであった。１．「上行性カテコールアミンニューロンのCRH産生分泌促進機能について」①幼少期に身体抑制を行い、成長後に新規環境ストレスを負荷し、in vivo microdialysisにより灌流液を採取し、カテコールアミン量を高速液体クロマトグラフィーにより測定する。② 実験終了後、各ラットを断頭し、凍結ミクロトームを用いて、室傍核を含む連続切片を作製し、in situ hybridyzationによりCRHmRNAの発現を定量化する。２．「視床下部視交叉上核の時計遺伝子発現について」①幼少期に身体抑制ストレスを与えた３か月後の正午に、各ラットを断頭し直ちに脳を採取し、-80℃にて保存する。②凍結ミクロトームを用いて、SCNを含む凍結切片を作製し、in situ hybridyzationにより時計遺伝子（per2）の発現を検出し定量化する。③幼少期身体抑制ストレスが成長後のラット時計遺伝子（per2）の発現にどのように影響しているか、検討する。研究結果１．幼少期に身体抑制を行い、成長後に新規環境ストレスを負荷したラット室傍核のカテコールアミンおよびCRHmRNA発現量は対象群に比較して、有意に上昇していた。２．幼少期に身体抑制を行い、成長後に新規環境ストレスを負荷したラットの時計遺伝子（per2）の発現量は対象群に比較して、有意な差はなかった。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned. Reason 計画通り、研究は進んでいる。
Strategy for Future Research Activity	当初の研究計画通りに進める予定である。
Causes of Carryover	実験で使用する試薬購入費が少なく済んだため。
Expenditure Plan for Carryover Budget	次年度にも試薬が必要であり、その購入費に充てる。また次年度は研究計画最終年度であるので、研究業績の発表（学会発表、論文作成）の費用に充てる予定である。