2015 Fiscal Year Annual Research Report
RNAプログラムの破綻に起因する歯根形成異常に関する分子遺伝学的研究
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25463167
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| Research Institution | Tokyo Medical and Dental University |
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Principal Investigator |
小川 卓也 東京医科歯科大学, 医歯(薬)学総合研究科, 講師 (50401360)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
森山 啓司 東京医科歯科大学, 医歯(薬)学総合研究科, 教授 (20262206)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 歯学 / 人類遺伝学 / OFCD症候群 / BCOR / 歯根形成 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
Oculofaciocardiodental (OFCD) syndromeはX連鎖性優性遺伝形式の女性のみに発症するまれな疾患で、特異的顔貌、心臓および眼の異常、ならびに長い歯根といった臨床的特徴を認める。原因遺伝子であるencoding BCL-6-interacting corepressor (BCOR) は転写抑制因子とされているが、その機能には不明な点が多い。そこで、２７年度はOFCD syndromeにおいて既に報告されている変異を含むBCORの機能解析を行い、核移行シグナル (nuclear localization signal: NLS) の同定を試みた。 方法として、Site-directed mutagenesisを用い、変異蛋白発現ベクターを作製し、COS7細胞に遺伝子導入し、細胞内における変異蛋白の局在を免疫染色により検討した。さらに、NLSプログラム解析 (NLS mapperならびにPSORT II) により、 古典的核移行シグナルを同定することとした。結果として、 遺伝子型と表現型の明らかな関連性は認められなかったものの、免疫染色ならびにNLSプログラム解析により、BCORのアミノ酸配列中に古典的核移行シグナルを２カ所（RVDRKRKVSGD, aa1131-1141 (NLS1)； LKAKRRRVSK, aa1158-1167 (NLS2)）同定することができた。NLS1およびNLS2を含むBCORの局在は主に核内であったものの、NLS2内のアミノ酸配列を変異させたところ、核内だけでなく細胞質にも局在を認めた。一方、NLS1内のアミノ酸配列のみに変異を加えると、主に核内でその局在を認めた。以上により、 NLS2がBCORの核移行に重要な機能を果たしており、疾患原因遺伝子の機能解明に患者情報の有用性が示唆された。
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