2014 Fiscal Year Research-status Report
喫煙が歯周病原菌の宿主細胞侵入に及ぼす影響の分子メカニズム解明
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25463228
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| Research Institution | Tokyo Dental College |
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Principal Investigator |
齋藤 淳 東京歯科大学, 歯学部, 教授 (60266559)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
石原 和幸 東京歯科大学, 歯学部, 教授 (00212910)
高山 沙織 東京歯科大学, 歯学部, 助教 (00550013)
国分 栄仁 東京歯科大学, 歯学部, 助教 (70453785)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 喫煙 / タバコ煙 / 歯周炎 / 歯周病原細菌 / 歯肉上皮細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
喫煙は歯周病の重大なリスクファクターであるとともに，歯周病治療の成果にも悪影響を与えることが示唆されている。これまで喫煙が歯周組織に及ぼす影響を明らかにすべく，タバコ煙暴露下における宿主細胞の機能を検討するためのモデルを使用して実験を行ってきた。
平成25年度の成果を基に，26年度は引き続きタバコ煙抽出物（CSC）とヒト歯肉上皮細胞（Ca9-22）を使用した実験を行った。Ca9-22 を10% FBS 添加MEMにてコンフルエントに達するまで培養した。前年度までの検討で明らかにした，遊走能を促進させたCSC濃度のCSCを24 h 作用させ，遊走に関与しているとの報告があるintegrin α3 の発現局在を共焦点レーザー顕微鏡 (CSLM) にて観察した。さらにintegrin α3 のmRNA発現をreal-time RT-PCR を用いて定量した。以上の実験は，Porphyromonas gingivalis ATCC 33277の感染下 (MOI= 100, 2 h) でも行った。Ca9-22の創傷閉鎖について，wound healing assayを使用し検討した結果，scratch側に近接した細胞においてintegrin α3の発現の亢進が観察され，さらにmRNA 量も約2倍の増加を示した。一方，P. gingivalisを感染させるとCa9-22の遊走能，integrin α3の発現は全体的に抑制され， CSCによる促進傾向は認められなかった。
以上の結果から，CSCが及ぼすヒト歯肉上皮細胞の遊走能への二相性の影響には，は細胞骨格とintegrin発現の変化が関与していることが示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
当初予定していた計画どおりほぼ順調に進んでいる。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後はCSC暴露下でのヒト歯肉上皮細胞への歯周病原細菌の侵入を検討し，それが遊走能に及ぼす影響を明らかにする。さらに，CSCの濃度によるヒト歯肉上皮細胞の機能への影響に関わるシグナル伝達系の解析を行う予定である。
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| Causes of Carryover |
消耗品が当初予想していたよりも低い価格で購入できたため。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
ウェスタンブロット関連の試薬またはPCR関連の試薬購入に使用予定である。
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