2015 Fiscal Year Annual Research Report
喫煙が歯周病原菌の宿主細胞侵入に及ぼす影響の分子メカニズム解明
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25463228
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| Research Institution | Tokyo Dental College |
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Principal Investigator |
齋藤 淳 東京歯科大学, 歯学部, 教授 (60266559)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
石原 和幸 東京歯科大学, 歯学部, 教授 (00212910)
高山 沙織 東京歯科大学, 歯学部, 助教 (00550013) [Withdrawn]
国分 栄仁 東京歯科大学, 歯学部, 講師 (70453785)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | P. gingivalis / タバコ煙 / 細胞侵入 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
喫煙は歯周病の重大なリスクファクターであるとともに，歯周病治療の成果にも悪影響を与えることが示唆されている。これまで喫煙が歯周組織に及ぼす影響を明らかにすべく，タバコ煙暴露下における宿主細胞の機能を検討するためのモデルを使用して実験を行ってきた。平成25年度，26年度の成果を基に，27年度は引き続きタバコ煙抽出物（CSC）とヒト歯肉上皮細胞（Ca9-22）を使用した実験を行った。CSCで刺激したCa9-22に対するP. gingivalis感染の影響を，細胞内侵入の面から解析した。まず，Ca9-22 を10% FBS 添加MEMにてサブコンフルエントに達するまで培養した。前年度までの検討で明らかにした，各種濃度のCSCを24 h 作用させ，P. gingivalisをMOI=100の条件で2時間感染させた。Saito et al. (FEMS Immunol Med Microbiol)の方法に従ってantibiotic protection assayを使用して細胞内侵入を評価した。侵入率はCSC 1ug/mlの濃度で有意に高い値を示した。細胞内外の細菌を染め分ける二重染色法を使用した共焦点レーザー顕微鏡での観察においても，この濃度において最も多くのP. gingivalisのCa9-22への侵入が確認された。
以上のことから，低濃度のCSCは，歯肉上皮細胞の細胞骨格やインテグリン発現を制御することにより，P. gingivalisの歯肉上皮細胞への侵入を促す可能性が示唆された。
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