2013 Fiscal Year Research-status Report
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25560407
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
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| Research Institution | Tokyo University of Science |
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Principal Investigator |
早川 洋一 東京理科大学, 薬学部, 教授 (20208606)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | チオアミド / 生合成 / Streptomyces / thioviridamide / roseophilin |
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| Research Abstract |
Thioviridamide生産菌Streptomyces olivoviridis NA05001のドラフトゲノム解析を行い、thioviridamide前駆体ペプチドをコードする遺伝子tvaAを同定した。次に、生産菌のゲノムライブラリーから、tvaAとその下流に位置する14個のORFを含む約15 kbpの遺伝子クラスターをクローニングした。さらに、サブクローニングした遺伝子クラスターをStreptomyces lividansにおいて発現させ、thioviridamideの生産を確認することにより、thioviridamide生合成遺伝子クラスターをtvaA～tvaLの12遺伝子であると同定した。本クラスターには、4個の機能未知遺伝子が含まれており、これらがチオアミド化酵素遺伝子の候補と考えられる。
Roseophilin生合成遺伝子のうちフラン環形成またはクロル化に関与する可能性があるのはprodigiosin側鎖環化遺伝子redGと相同性を有するrphG、rphG2、rphG3、rphG4である。これらの遺伝子それぞれをprodigiosin生産菌Streptomyces coelicolorのredG破壊株に導入したが、フラン環をもつprodigiosin類やprodigiosin環化体の生産は確認されなかった。そこで、roseophilinと同じ鎖長の側鎖をもつprodigiosin類を生産すると報告されているredP破壊株を作製し、同様の実験を試みている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
Roseophilinの生合成遺伝子について、類縁化合物であるprodigiosinの生産菌を用いて機能同定を試みたが、側鎖環化遺伝子の候補を導入しても環化体が得られず、環化、クロル化、フラン環形成などの機能同定に至らなかった。これはroseophilinの側鎖が炭素13個のイソ型、prodigiosinの側鎖が炭素11個の直鎖型と異なっていることが原因と考えられる。
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| Strategy for Future Research Activity |
Prodigiosin生産菌のredP破壊株は炭素13個のイソ型側鎖を有するprodigiosinを生産することが報告されている。そこで、prodigiosin生産菌のredP遺伝子を破壊し、これを用いてroseophilin生合成遺伝子の機能同定を行う予定である。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
残った少額を有効利用するため、次年度に繰り越した。
次年度分と合算し、試薬類等の消耗品費として利用する。
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