2014 Fiscal Year Annual Research Report
ローリングサークル増幅と蛍光三重鎖DNAを組合わせたmiRNA検出法
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25620126
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| Research Institution | Tokyo Institute of Technology |
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Principal Investigator |
清尾 康志 東京工業大学, 生命理工学研究科, 准教授 (20313356)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 蛍光核酸 / 三重鎖核酸 / 遺伝子検出 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
miRNAは種々の疾患の診断マーカーとして注目されている。生体内には非常に多種のmiRNAが同時に存在し、それらが複数の遺伝子を制御している。つまり、miRNAを迅速に検出するには、生体・組織・細胞中の多種類のmiRNAをワンポットで検出するmultiplex検出技術が必要不可欠である。本研究では起案者独自の蛍光三重鎖DNAとRCAを組合わせた新規検出法によりmiRNAのmultiplex検出を実現することを目指した。
平成２５年度までに合成した５-(４－ヒドロキシ-3-メチルベンゾフラン-2-イル）デオキシウリジンからさらに構造を改変し、４－シアノ、４－アミノ、４－ジメチルアミノ、４－エチニル、４－フェニルエチニル誘導体を合成しその蛍光特性を調べた。またウラシルに変えて７－デアザグアニンにベンゾフランを導入した誘導体の合成にも成功した。その結果、置換基を導入することでより長波長に蛍光は長がシフトした誘導体を開発することに成功した。これらの蛍光核酸は三重鎖形成に伴い様々波長で蛍光を発するプローブの開発に有用であり、miRNAのmultiplex検出への応用が可能である。
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[Journal Article] Controlling the fluorescence of benzofuran-modified uracil residues in oligonucleotides by triple-helix formation2015
Author(s)
Takashi Kanamori, Hiroki Ohzeki, Yoshiaki Masaki, Akihiro Ohkubo, Mari Takahashi, Kengo Tsuda, Takuhiro Ito, Mikako Shirouzu, Kanako Kuwasako, Yutaka Muto, Mitsuo Sekine, Kohji Seio
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Journal Title
Chembiochem
Volume: 16
Pages: 167-176
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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