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2013 Fiscal Year Research-status Report

線虫の自発的行動発現に関わる神経回路活動の可視化と解析

Research Project

Project/Area Number 25640004
Research Category

Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research

Research InstitutionSaitama University

Principal Investigator

安藤 恵子  埼玉大学, 脳科学融合研究センター, 特任准教授 (40221741)

Project Period (FY) 2013-04-01 – 2015-03-31
Keywordsイメージング / 線虫 / G-CaMP
Research Abstract

多くの動物は外部からの感覚刺激がなくても自発的に行動を発現し制御するが、その詳細なメカニズムはほとんどわかっていない。本研究は、全神経回路の接続が明らかにされている線虫Caenorhabditis elegansを対象として、随意行動開始の信号処理を担う神経回路を単一細胞レベルで同定することを目指している。
線虫は固形培地上で主に前進しながら餌の探索行動をするが、時々自発的に後退運動を行う。そこで、平成25年度は、明確な外部感覚刺激のない条件下で線虫を自由行動させ、後退開始の信号処理を担う神経回路を探索する系の開発を試みた。我々は、運動中の動物の神経活動を高解像度で測定するために、高速共焦点レーザー顕微鏡に自動追尾装置を組み込んだ顕微鏡システムを開発している。このシステムの操作性をさらに高めるため、顕微鏡の下部光学系を新たに改良した。それにより、動く線虫を広い視野で効率よく見つけながら、神経活動の高倍率のイメージング画像を撮像することが可能になった。さらにプログラムに改良を加え、これまで以上にスムーズな自動追尾に成功している。また、研究実施計画に基づき、所属研究室で開発された高感度のカルシウムセンサー(改良型G-CaMP)を神経系に組み込んだ遺伝子改変動物を複数系統作成した。これらの動物の神経活動を改良した自動追尾顕微鏡システムを用いて解析した結果、自由行動中の運動方向のスイッチングにおいて特徴的な神経活動が観察された。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

平成25年度は、センサーを組み込んだ動物の開発と自動追尾システムの光学測定系開発により、後退開始の信号処理を担う神経回路を探索する系の確立を目標に掲げていた。前者の目標はほぼ達成されており、また後者についても自動追尾顕微鏡システムの操作性が格段に高くなり、作成した動物を網羅的に解析する見通しが立っている。これらのシステムを用いて次年度さらに解析を続けることで、本申請の目標が達成できる可能性があり、おおむね順調に進展していると考えている。

Strategy for Future Research Activity

平成25年度に引き続き、センサーを組み込んだ遺伝子改変動物を用いて自由行動中の神経活動を定量的に解析し、自発的な運動方向転換前に活動あるいは抑制されるニューロンを網羅的に探索する。また、感覚ニューロンにチャネルロドプシンを発現させ、後退運動を光刺激で誘発した際の神経活動を測定し、自発的後退運動と刺激による忌避行動を対比して解析する。さらに、自発的なスイッチングに特徴的なニューロン活動をオプトジェネティクスによる光操作で活性化あるいは不活性化して行動への影響を調べ、自発行動に関わる神経回路の同定を目指す。

  • Research Products

    (11 results)

All 2013

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results) Presentation (10 results) (of which Invited: 1 results)

  • [Journal Article] Arl8/ARL-8 functions in apoptotic cell removal by mediating phagolysosome formation in Caenorhabditis elegans.2013

    • Author(s)
      Sasaki A, Nakae I, Nagasawa M, Hashimoto K, Abe F, Saito K, Fukuyama M, Gengyo-Ando K, Mitani S, Katada T, Kontani K
    • Journal Title

      Mol Biol Cell

      Volume: 24 Pages: 1584-1592

    • DOI

      10.1091/mbc.E12-08-0628.

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] in vivo カルシウムイメージングと光操作による神経回路の機能解析2013

    • Author(s)
      安藤恵子
    • Organizer
      分子生物学コロキウム
    • Place of Presentation
      ホテルグランヴィア岡山(岡山)
    • Year and Date
      20131207-20131207
    • Invited
  • [Presentation] 受精における表層顆粒分泌の制御因子RAB-11に結合する新規因子の解析2013

    • Author(s)
      坂口 愛沙,佐藤 美由紀,安藤 恵子,佐藤 克哉,中井 淳一,佐藤 健
    • Organizer
      第36回日本分子生物学会年会
    • Place of Presentation
      神戸ポートアイランド(神戸)
    • Year and Date
      20131203-20131206
  • [Presentation] 線虫C. elegansの生殖系列細胞におけるGPIアンカー型タンパク質の解析2013

    • Author(s)
      松田 采子, 村田 大輔, 野村 和子,秋好 紗弥香,出嶋 克史,Lance Wells,Karen L. Abbott,川崎 ナナ,安藤 恵子,中台 枝里子,三谷 昌平,野村 一也
    • Organizer
      第36回日本分子生物学会年会
    • Place of Presentation
      神戸ポートアイランド(神戸)
    • Year and Date
      20131203-20131206
  • [Presentation] Development of a high-resolution Ca2+ imaging and optogenetic control system in freely moving C.elegans2013

    • Author(s)
      Yuko Kagawa-Nagamura, Keiko Gengyo-Ando, Masamichi Ohkura, Xianfeng Fei, Kouichi Hashimoto, Junichi Nakai
    • Organizer
      BSI RETREAT 2013
    • Place of Presentation
      軽井沢プリンスホテル(軽井沢)
    • Year and Date
      20131121-20131122
  • [Presentation] A neuronal mechanism for navigation along a repulsive odor gradient.2013

    • Author(s)
      Akiko Yamazoe, Yuki Tanimoto, Kosuke Fujita, Yuya Kawazoe,Yosuke Miyanishi, Shuhei Yamazaki, Xianfeng Fei, Karl Emanuel Busch, Keiko Gengyo-Ando, Junichi Nakai, Yuichi Iino, Yuishi Iwasaki, Koichi Hashimoto, Kotaro Kimura
    • Organizer
      The 19th international C. elegans meeting 2013
    • Place of Presentation
      Los Angeles(USA)
    • Year and Date
      20130626-20130630
  • [Presentation] A virtual reality running machine for worms-a highly integrated microscope system for olfactory behavior.2013

    • Author(s)
      Yuki Tanimoto, Kosuke Fujita, Yuya Kawazoe, Yosuke Miyanishi, Shuhei Yamazaki, Xianfeng Fei, Karl Emanuel Busch, Keiko Gengyo-Ando, Junichi Nakai, Koichi Hashimoto, Kotaro Kimura.
    • Organizer
      The 19th international C. elegans meeting 2013
    • Place of Presentation
      Los Angeles(USA)
    • Year and Date
      20130626-20130630
  • [Presentation] In vivo calcium imaging of motor circuit during spontaneous locomotion using improved G-CaMPs.2013

    • Author(s)
      K. Gengyo-Ando, Y. Kagawa-Nagamura, M. Ohkura, X. Fei, M. Suzuki, K. Hashimoto, J. Nakai.
    • Organizer
      The 19th international C. elegans meeting 2013
    • Place of Presentation
      Los Angeles(USA)
    • Year and Date
      20130626-20130630
  • [Presentation] Real-time optogenetic control and imaging of neuromuscular activity in freely moving Caenorhabditis elegans.2013

    • Author(s)
      Yuko Kagawa-Nagamura, Keiko Gengyo-Ando, Masamichi Ohkura, Xianfeng Fei, Kouichi Hashimoto, Junichi Nakai
    • Organizer
      Neuro 2013
    • Place of Presentation
      国立京都国際会館(京都)
    • Year and Date
      20130620-20130623
  • [Presentation] 自由運動中の線虫の高解像度カルシウムイメージングシステムの開発2013

    • Author(s)
      安藤恵子、永村ゆう子、大倉正道、Xianfeng Fei、橋本浩一、中井淳一
    • Organizer
      第46回日本発生生物学会大会
    • Place of Presentation
      くにびきメッセ(松江)
    • Year and Date
      20130528-20130531
  • [Presentation] 光技術による線虫出力系回路の機能解析と運動機構の解明2013

    • Author(s)
      安藤恵子
    • Organizer
      井川洋二先生追悼シンポジウム「ライフサイエンス筑波研究センター研究連絡会」
    • Place of Presentation
      理研・森脇和郎ホール(つくば)
    • Year and Date
      20130511-20130512

URL: 

Published: 2015-05-28  

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