2015 Fiscal Year Research-status Report
ノンコーディングＲＮＡによるヒトES細胞の神経分化制御機構の解析
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25640038
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| Research Institution | Aichi Medical University |
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Principal Investigator |
岡田 洋平 愛知医科大学, 医学部, 准教授 (30383714)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | ヒトES細胞 / ノンコーディングRNA / 神経分化 / ヒトiPS細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
これまでの研究で、ヒトES/iPS細胞の神経分化に伴って発現が上昇する、非翻訳領域にある転写産物の中で、特に発現量が高く、神経系特異的であると考えられる転写産物52個を同定した。さらに、独自に開発した単層培養による迅速神経分化誘導法において、このうち40個の転写産物の発現上昇の再現性を確認することができた。そこで、この40個の転写産物を初期の神経発生に重要なncRNAの候補として解析を進めている。
一方、従来の単層培養による迅速神経分化誘導法では、標的ncRNAに対するsiRNAを導入した際に神経分化誘導が不安定になることがあり、スクリーニングの障壁となっていた。そこで、神経分化誘導に用いる低分子化合物を、より細胞毒性が低く特異性の高い低分子化合物へ変更することで、安定した神経分化誘導が可能になった。さらに、従来electroporationによりsiRNAを導入していたが、この方法だと細胞の生存率が低下する可能性があるため、ヒトiPS細胞(201B7)を用いて、Lipofectionにより未分化ヒトiPS細胞へ遺伝子導入を行う条件を最適化した。これらの結果をもとに、より安定的なスクリーニング条件を検討し、解析を進める予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
単層培養による迅速神経分化誘導法の改良と、siRNAの導入条件の検討に時間を要したため、当初の予定より、やや進捗が遅れている。
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| Strategy for Future Research Activity |
単層培養による迅速神経分化誘導法の改良と遺伝子導入法の改善により、安定的スクリーニング条件を確立し、より効率的なスクリーニングを進めていく予定である。
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| Causes of Carryover |
効率的な物品調達が可能であったため、当初の予定に比べて、少ない物品費での研究の遂行が可能であった。また、研究室の移動やセットアップなどによる研究の中断・遅延が発生したため、次年度使用額が生じた。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
培地などの試薬、消耗品や実験機器の購入に充てる予定である。
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Research Products
(17 results)
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[Journal Article] Establishment of in vitro FUS-associated Familial Amyotrophic Lateral Sclerosis Model Using Human Induced Pluripotent Stem Cells2016
Author(s)
Ichiyanagi N, Fujimori K, Yano M, Ishihara-Fujisaki C, Sone T, Akiyama T, Okada Y, Akamatsu W, Matsumoto T, Ishikawa M, Nishimoto Y, Ishihara Y, Sakuma T, Yamamoto T, Tsuiji H, Suzuki N, Warita H, Aoki M, Okano H.
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Journal Title
Stem Cell Reports.
Volume: 6
Pages: 496-510
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Tumour resistance in induced pluripotent stem cells derived from naked mole-rats2016
Author(s)
Miyawaki S, Kawamura Y, Oiwa Y, Shimizu A, Hachiya T, Bono H, Koya I, Okada Y, Kimura T, Tsuchiya Y, Suzuki S, Onishi N, Kuzumaki N, Matsuzaki Y, Narita M, Ikeda E, Okanoya K, Seino K, Saya H, Okano H, Miura K.
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Journal Title
Nat. Commun.
Volume: 7
Pages: 11471
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Differentiation of multipotent neural stem cells derived from Rett syndrome patients is biased toward the astrocytic lineage.2015
Author(s)
Andoh-Noda T, Akamatsu W, Miyake K, Matsumoto T, Yamaguchi R, Sanosaka T, Okada Y, Kobayashi T, Ohyama M, Nakashima K, Kurosawa H, Kubota T, Okano H.
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Journal Title
Molecular Brain
Volume: 8
Pages: 31
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] I2020T mutant LRRK2 iPSC-derived neurons in the Sagamihara family exhibit increased Tau phosphorylation through the AKT/GSK-3β signaling pathway.2015
Author(s)
Ohta E, Nihira T, Uchino A, Imaizumi Y, Okada Y, Akamatsu W, Takahashi K, Hayakawa H, Nagai M, Ohyama M, Ryo M, Ogino M, Murayama S, Takashima A, Nishiyama K, Mizuno Y, Mochizuki H, Obata F, Okano H.
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Journal Title
Hum Mol Genet.
Volume: 24
Pages: 4879-4900
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Investigation of the fatty acid transporter-encoding genes SLC27A3 and SLC27A4 in autism.2015
Author(s)
Maekawa M, Iwayama Y, Ohnishi T, Toyoshima M, Shimamoto C, Hisano Y, Toyota T, Balan S, Matsuzaki H, Iwata Y, Takagai S, Yamada K, Ota M, Fukuchi S, Okada Y, Akamatsu W, Tsujii M, Kojima N, Owada Y, Okano H, Mori N, Yoshikawa T.
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Journal Title
Sci Rep.
Volume: 5
Pages: 16239
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Rapid, efficient, and simple motor neuron differentiation from human pluripotent stem cells.2015
Author(s)
Shimojo D, Onodera K, Doi-Torii Y, Ishihara Y, Hattori C, Miwa Y, Tanaka S, Okada R, Ohyama M, Shoji M, Nakanishi A, Doyu M, Okano H*, Okada Y*
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Journal Title
Mol Brain.
Volume: 8
Pages: 79
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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