2016 Fiscal Year Annual Research Report
The roles of non-coding RNAs on neural differentiaton of human ESCs/iPSCs
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25640038
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| Research Institution | Aichi Medical University |
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Principal Investigator |
岡田 洋平 愛知医科大学, 医学部, 准教授 (30383714)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | ヒトES細胞 / ヒトiPS細胞 / ノンコーディングRNA / 神経分化 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
これまでの研究で、ヒトES/iPS細胞の神経分化に伴って発現が上昇する、非翻訳領域にある転写産物の中で、特に発現量が高く、神経系特異的であると考えられる転写産物52個を同定した。さらに、独自に開発した単層培養による迅速神経分化誘導法において、このうち40個の転写産物の発現上昇の再現性を確認することができた。そこで、この40個の転写産物を初期の神経発生に重要なncRNAの候補として解析を進めている。
これまでの解析では、スクリーニングのためのsiRNAをヒトES細胞、ヒトiPS細胞に導入する際に著しい細胞死が誘導され、解析の大きな障壁となってきた。そこで、より安定的なスクリーニング系の構築を進めてきた。まず、神経分化誘導に用いる低分子化合物を、より細胞毒性が低く特異性の高い低分子化合物へ変更することで、分化誘導時の細胞死を軽減し、より効率的な神経分化誘導が可能になった。また、フィーダーフリー下で培養したヒトiPS細胞から、簡便で安定的に神経細胞を誘導する培養法を確立した。さらに遺伝子導入方法をelectroporation法から、Reverse trasnfectionを応用したLipofection法に変更することで、遺伝子導入後の細胞生存率が改善し、解析を安定化することが可能になった。今後、これらの方法を従来の培養法に応用したスクリーニング系を用いて、解析を進めていく予定である。
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[Journal Article] Ishigaki S, Fujioka Y, Okada Y, Riku Y, Udagawa T, Honda D, Yokoi S, Endo K, Ikenaka K, Takagi S, Iguchi Y, Sahara N, Takashima A, Okano H, Yoshida M, Warita H, Aoki M, Watanabe H, Okado H, Katsuno H, Sobue G.2017
Author(s)
Ishigaki S, Fujioka Y, Okada Y, Riku Y, Udagawa T, Honda D, Yokoi S, Endo K, Ikenaka K, Takagi S, Iguchi Y, Sahara N, Takashima A, Okano H, Yoshida M, Warita H, Aoki M, Watanabe H, Okado H, Katsuno H, Sobue G.
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Journal Title
Cell Reports
Volume: 18
Pages: 1118-1131
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Correlation of insulin resistance and motor function in spinal and bulbar muscular atrophy.2017
Author(s)
Nakatsuji H, Araki A, Hashizume A, Hijikata Y, Yamada S, Inagaki T, Suzuki K, Banno H, Suga N, Okada Y, Ohyama M, Nakagawa T, Kishida K, Funahashi T, Shimomura I, Okano H, Katsuno M, Sobue G.
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Journal Title
J Neurol.
Volume: 264
Pages: 839-847
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Establishment of in vitro FUS-associated Familial Amyotrophic Lateral Sclerosis Model Using Human Induced Pluripotent Stem Cells2016
Author(s)
Ichiyanagi N, Fujimori K, Yano M, Ishihara-Fujisaki C, Sone T, Akiyama T, Okada Y, Akamatsu W, Matsumoto T, Ishikawa M, Nishimoto Y, Ishihara Y, Sakuma T, Yamamoto T, Tsuiji H, Suzuki N, Warita H, Aoki M, Okano H.
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Journal Title
Stem Cell Reports.
Volume: 6
Pages: 496-510
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Tumour resistance in induced pluripotent stem cells derived from naked mole-rats2016
Author(s)
Miyawaki S, Kawamura Y, Oiwa Y, Shimizu A, Hachiya T, Bono H, Koya I, Okada Y, Kimura T, Tsuchiya Y, Suzuki S, Onishi N, Kuzumaki N, Matsuzaki Y, Narita M, Ikeda E, Okanoya K, Seino K, Saya H, Okano H, Miura K.
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Journal Title
Nat. Commun.
Volume: 7
Pages: 11471
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Analysis of induced pluripotent stem cells carrying 22q11.2 deletion2016
Author(s)
Toyoshima M, Akamatsu W, Okada Y, Ohnishi T, Balan S, Hisano Y, Iwayama Y, Toyota T, Matsumoto T, Itasaka N, Sugiyama S, Tanaka M, Yano M, Dean B, Okano H, Yoshikawa T
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Journal Title
Translational Psychiatry
Volume: 6
Pages: e934
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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