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2015 Fiscal Year Annual Research Report

クロマチンループ構造の人為的改変による核内構造の操作

Research Project

Project/Area Number 25650014
Research InstitutionTokyo Metropolitan Institute of Medical Science

Principal Investigator

正井 久雄  公益財団法人東京都医学総合研究所, ゲノム医科学研究分野, 副所長 (40229349)

Project Period (FY) 2013-04-01 – 2016-03-31
KeywordsRif1タンパク質 / クロマチンループ / 核内染色体構造 / 複製タイミング / グアニン4重鎖構造 / 核膜 / 転写 / 染色体核内配置
Outline of Annual Research Achievements

本研究では、申請者の独自の発見「Rif1はクロマチンループ構造の形成を介して複製タイミング機能ドメインを規定する」に基づき、Rif1を用いてクロマチンループ構造の人為的改変を介して核内構造を操作し、細胞の機能改変を誘導する新規技法を開発する。Rif1を用いて、染色体の核内配置や高次構築を操作するために、1) 発現レベルを変動することによりゲノム全体のクロマチンループ構造を操作する、2) 部位特異的にクロマチンループを形成し、局所的に染色体機能ドメインを操作する、の二つのアプローチをとる。
1)については昨年度、分裂酵母でRif1を増産すると核内染色体構造の異常が誘導され、著しい増殖阻害が観察される事を見出した。本年はこの増殖阻害は脱リン酸酵素PP1の結合には依存しないことを見出した。また生育温度が阻害効果に大きな影響を及ぼすことを発見した(高温37°Cでは阻害されない)。
2)Rif1タンパク質の機能ドメインを解析した結果C端271aaでG4構造に結合すること、一方N端のHEAT Repeat構造も親和性の高い結合に必要であることが明らかとなった。
3)C端近傍の保存配列をアラニン置換することによりG4結合が喪失した。
4)転写によりRif1が結合しうるグアニン4重鎖構造が形成されることを発見した。
これらの知見から、増産しても増殖阻害しないがG4結合能を有し、染色体の核内配置を変化させうる変異体の開発、G4形成配列を特定の部位に導入することによる染色体機能の変換、あるいはG4構造近傍の転写を制御することによりRif1結合を制御し、染色体高次構造の改変を行う などの新しいアプローチを実行している。

Remarks

http://www.igakuken.or.jp/genome/

  • Research Products

    (17 results)

All 2016 2015

All Journal Article (12 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Peer Reviewed: 10 results,  Acknowledgement Compliant: 11 results,  Open Access: 2 results) Presentation (3 results) (of which Int'l Joint Research: 3 results,  Invited: 3 results) Book (2 results)

  • [Journal Article] Characterization of conserved arginine residues on Cdt1 that affect licensing activity and interaction with Geminin or Mcm complex.2016

    • Author(s)
      Zhiying You, Koji L. Ode, Haruhiko Takisawa, and *Hisao Masai
    • Journal Title

      Cell Cycle

      Volume: 3 Pages: TBA

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Fork restart protein, PriA, binds around oriC after depletion of nucleotide precursors: Replication fork arrest near the replication origin.2016

    • Author(s)
      Tanaka T, Nishito Y, *Masai H.
    • Journal Title

      Biochem. Biophys. Res. Commun.

      Volume: 470 Pages: 546-551

    • DOI

      10.1016/j.bbrc.2016.01.108. Epub 2016 Jan 20.

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Epigenetic Regulation of the Blimp-1 Gene (Prdm1) in B Cells Involves Bach2 and Histone Deacetylase 3.2016

    • Author(s)
      Tanaka H, Muto A, Shima H, Katoh Y, Sax N, Tajima S, Brydun A, Ikura T, Yoshizawa N, Masai H, Hoshikawa Y, Noda T, Nio M, Ochiai K, *Igarashi K.
    • Journal Title

      J. Biol. Chem.

      Volume: 291 Pages: 6316-6330

    • DOI

      10.1074/jbc.M116.713842. Epub 2016 Jan 19.

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Phosphorylation of TAR DNA-binding Protein of 43 kDa (TDP-43) by Truncated Casein Kinase 1δ Triggers Mislocalization and Accumulation of TDP-43.2016

    • Author(s)
      *Nonaka T, Suzuki G, Tanaka Y, Kametani F, Hirai S, Okado H, Miyashita T, Saitoe M, Akiyama H, Masai H, Hasegawa M.
    • Journal Title

      J. Biol. Chem.

      Volume: 291 Pages: 5473-5483

    • DOI

      10.1074/jbc.M115.695379. Epub 2016 Jan 14.

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Claspin recruits Cdc7 kinase for initiation of DNA replication in human cells.2016

    • Author(s)
      Chi-Chun Yang, Masahiro Suzuki, Shiori Yamakawa, Syuzi Uno, Ai Ishii, Satoshi Yamazaki, Rino Fukatsu, Ryo Fujisawa, Kenji Sakimura3, Toshiki Tsurimoto, *Hisao Masai
    • Journal Title

      Nature Communications

      Volume: TBA Pages: TBA

    • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Rif1はグアニン4重鎖構造を介して染色体に結合し、広範囲に複製を抑制する2016

    • Author(s)
      加納 豊、松本 清治、正井 久雄
    • Journal Title

      実験医学

      Volume: 34-no.3 Pages: 458-461

    • Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] CDC28 phosphorylates Cac1p and regulates the association of Chromatin Assembly Factor I with chromatin.2015

    • Author(s)
      Jeffery, D., Kakusho, N., You, Z., Gharib, M., Wyse, B., Drury, E., Weinreich, M., Thibault, P. Verreault, A., Masai, H. and *Yankulov, K.
    • Journal Title

      Cell Cycle

      Volume: 14 Pages: 74-85

    • DOI

      10.4161/15384101.2014.973745.

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Definition of the transcription factor TdIF1 consensus binding sequence through genome-wide mapping of its binding sites.2015

    • Author(s)
      Kotaro Koiwai, Takashi Kubota, Nobuhisa Watanabe, Katsutoshi Hori, Osamu Koiwai and *Hisao Masai
    • Journal Title

      Genes to Cells

      Volume: 20 Pages: 242-254

    • DOI

      10.1111/gtc.12216. Epub 2015 Jan 26.

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] The DNA-Binding Domain of S. pombe Mrc1 (Claspin) Acts to Enhance Stalling at Replication Barriers.2015

    • Author(s)
      Zech, J., Godfrey, E.L., Masai, H., Hartsuiker, E. and *Dalgaard, J.Z.
    • Journal Title

      PLoS One

      Volume: 10 Pages: e0132595

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0132595. eCollection 2015.

    • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] BTB-ZF Protein Znf131 Regulates Cell Growth of Developing and Mature T Cells.2015

    • Author(s)
      Iguchi, T., Aoki, K., Ikawa, T., Taoka, M., Taya, C., Yoshitani, H., Toma-Hirano, M., Koiwai, O., Isobe, T., Kawamoto, H., Masai, H. and *Miyatake, S.
    • Journal Title

      J. Immunol.

      Volume: 195 Pages: 982-993

    • DOI

      10.4049/jimmunol.1500602. Epub 2015 Jul 1.

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Rif1 binds to G-quadruplexes and suppresses replication over long distances.2015

    • Author(s)
      Yutaka Kanoh, Seiji Matsumoto, Rino Fukatsu, Naoko Kakusho, Nobuaki Kono, Claire Renard-Guillet, Koji Masuda, Keisuke Iida, Kazuo Nagasawa, Katsuhiko Shirahige, and *Hisao Masai
    • Journal Title

      Nature Struct. Mol. Biol.

      Volume: 22 Pages: 889-897

    • DOI

      10.1038/nsmb.3102. Epub 2015 Oct 5.

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Rif1はグアニン4重鎖構造を形成するDNAを介して染色体へ結合し複製の開始を広範囲にわたり抑制する2015

    • Author(s)
      加納 豊、松本 清治、正井 久雄
    • Journal Title

      ライフサイエンス 新着論文レビュー

      Volume: - Pages: -

    • DOI

      10.7875/first.author.2015.127

  • [Presentation] Interaction with G-quadruplex structures forms a basis for Rif1-mediated regulation of DNA replication, transcription and chromatin architecture2015

    • Author(s)
      正井 久雄、加納 豊、松本 清治、覺正 直子、深津 理乃、森山 賢治、河野 暢明、飯田 啓介、長澤 和夫、増田 晃士、Claire Renard-Guillet、白髭 克彦、山崎 聡志、吉沢 直子
    • Organizer
      BMB2015
    • Place of Presentation
      神戸国際会議場(兵庫県神戸市)
    • Year and Date
      2015-12-01 – 2015-12-04
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] Roles of G-quadruplex structures in regulation of DNA replication.2015

    • Author(s)
      Hisao Masai, Yutaka Kanoh, Taku Tanaka, Kenji Moriyama, Yumika Seki, Seiji Matsumoto, Rino Fukatsu, Naoko Kakusho, Satoshi Yamazaki, Yumeka Matsushima, Naoko Yoshizawa, Keisuke Iida, Kazuo Nagasawa
    • Organizer
      Cold Spring Harbor Meeting EUKARYOTIC DNA REPLICATION & GENOME MAINTENANCE
    • Place of Presentation
      Cold Spring Harbor, New York,USA
    • Year and Date
      2015-09-01 – 2015-09-05
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] Interaction of Rif1 and G-quadruplex forms a basis of Rif1-mediated chromatin regulation.2015

    • Author(s)
      Hisao Masai, Rino Fukatsu, Naoko Kakusho, Yutaka Kanoh, Kenji Moriyama
    • Organizer
      The 8th international fission yeast meeting (Pombe2015)
    • Place of Presentation
      神戸国際会議場(兵庫県神戸市)
    • Year and Date
      2015-06-21 – 2015-06-25
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Book] The Initiation of DNA Replication in Eukaryotes "Rif1, a conserved chromatin factor regulating DNA replication, DNA repair and transcription."2015

    • Author(s)
      Naoko Yoshizawa, Satoshi Yamazaki, and *Hisao Masai
    • Total Pages
      623
    • Publisher
      Springer
  • [Book] DNA Replication, Recombination, and Repair "DNA Replication Timing: Temporal and Spatial Regulation of Eukaryotic DNA Replication."2015

    • Author(s)
      Hayano, M., Matsumoto, S. and *Masai, H.
    • Total Pages
      555
    • Publisher
      Springer

URL: 

Published: 2017-01-06  

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