2014 Fiscal Year Annual Research Report
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25650047
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
樋口 秀男 東京大学, 理学(系)研究科(研究院), 教授 (90165093)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 非侵襲 / in vivo / イメージング / マウス |
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| Outline of Annual Research Achievements |
今年度はGFPを用いても高感度でイメージングできることを確認するため，がん組織形成率データの信頼性を向上させるために検体数を増やし再検討を行った．KPL4-EB1-GFP, U87MG, MDA-MB-231 (WT), MDA-MB-231-GFP-tubulin の4株の他にMDA-MB-231-EB1-GFPを加え、計5株における接種細胞数の検討を行った．その結果，ある一定以上の接種細胞数があれば高確率（100％）でゼノグラフトモデルが作製できるという結果が得られ，データの信頼性を確認すことができた．
また，蛍光ナノ粒子（量子ドット）を用いて単一粒子の非侵襲イメージングを行ったが，単一粒子では観察することができないが，多粒子であれば，観察が可能であることが明らかとなった．ナノ粒子の蛍光を元に細胞の輪郭を同定できた．さらに，GFP発現細胞MDA-MB-231-GFP-tubulin細胞を用い,耳介内にがん組織作製し，スピンディスクタイプの共焦点顕微鏡により非侵襲下で観察した．装置をGFPを高感度観察するために，いくつかの改良を行った．まず，レーザーパワーを上げ，かつ照射領域を絞ることで，GFPであっても高感度で観察することが可能となった．背景光を減ずるためにより狭いバンドパスフィルターを用いた．細胞分裂直後と思われるGFP発現細胞を捉えることに成功した．さらにGFP発現がん組織全域（約2ｍｍ×約2ｍｍ×0.15ｍｍ）の3次元像を非侵襲にて捉えることにも成功した．
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