2013 Fiscal Year Research-status Report
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25650052
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
新井 由之 大阪大学, 産業科学研究所, 助教 (20444515)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 化学発光 |
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| Research Abstract |
化学発光タンパク質を用いたライブセルイメージングは、励起光を必要としないため、励起光による光毒性の影響を除外することが可能である。また、近年発展してきた、光によるタンパク質機能の制御技術である、オプトジェネティクスとの併用も容易である。しかしながら、化学発光観察では照明光学系が存在しないため、励起光を用いる蛍光観察法では可能な、照明方法を工夫することによる３次元断層像の取得を行うことができない。細胞は３次元構造物であり、化学発光観察においても３次元像を取ることができれば、化学発光観察においてもより鮮明なサブ細胞構造を観察することが可能であり、大きな利点となる。
そこで、本研究では、細胞を用いた化学発光観察において、３次元断層像を取得することが可能な光学顕微鏡システムの開発を目的としている。
本年度は、３次元化学発光観察を行うための顕微鏡システムの検討を中心に行った。対物レンズには球面収差があり、レンズを通る光の位置によって焦点位置が異なる。そのため、１点で焦点を結ぶことができず、像劣化の主な原因となることが知られている。本年度、球面収差を用いることで、レンズを通る特定の光のみを取り出せば、特定の焦点位置のみの光を取り出すことが可能であることが原理的に可能であることを確認した。しかし、像を形成するためには直接光と回折光を重ねあわせる必要があるが、この方法では、回折光のみを取り出すため直接光を合成する必要があることを確認した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
球面収差を利用した３次元断層像の取得が遅れている。
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| Strategy for Future Research Activity |
３次元断層観察を行うための方法として、球面収差を利用した方法が考えられる。最近の高開口数を持つ対物レンズには、球面収差を補正する為の補正環が備わっている。そこで、この補正環を操作することにより、逆に球面収差量を大きくさせることで、３次元断層像を行うことを試みる。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
平成２４年度購入予定であったカメラの購入を取りやめ、消耗品費としたため。
特注の光学部品や治具を開発することを計画しており、そのための物品費用として利用する。
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[Journal Article] Improved orange and red Ca2+ indicators and photophysical considerations for optogenetic applications.2013
Author(s)
Wu J, Liu L, Matsuda T, Zhao Y, Rebane A, Drobizhev M, Chang YF, Araki S, Arai Y, March K, Hughes TE, Sagou K, Miyata T, Nagai T*, Li WH*, Campbell RE.
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Journal Title
ACS Chem Neurosci.
Volume: 4
Pages: 969-972
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] SuperNova, a monomeric photosensitizing fluorescent protein for chromophore-assisted light inactivation.2013
Author(s)
Takemoto K, Matsuda T, Sakai N, Fu D, Noda M, Uchiyama S, Kotera I, Arai Y, Horiuchi M, Fukui K, Ayabe T, Inagaki F, Suzuki H, Nagai T.
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Journal Title
Scientific Reports
Volume: 3:2629
Pages: 1-7
DOI
Peer Reviewed
