2013 Fiscal Year Research-status Report
自然界から分離した細胞外小胞は、微生物へのシグナル運搬能を有するのか？
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25650105
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
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| Research Institution | University of Tsukuba |
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Principal Investigator |
野村 暢彦 筑波大学, 生命環境系, 教授 (60292520)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 細菌 / 細菌シグナル / メンブランベシクル / アシル化ホモセリンラクトンのシグナル |
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| Research Abstract |
初年度は、環境サンプルからのメンブランベシクルの調整法の構築とその中に細菌シグナルが存在するかを確認した。あらたな汚泥から、ベシクルを分離精製した。得られたベシクルについて、詳細に解析を進めた。その結果、メンブランベシクル画分の存在が超遠心分離法により確認出来た。それらについてさらに電子顕微鏡観察により粒子形状を確認すると多くは球状のものがほぼ全てであった。
次に、得られたメンブランベシクルに細菌シグナルが存在するか否かを調べた。その結果、アシル化ホモセリンラクトンのシグナルが存在する事が示された。具体的には、シグナル感受性細菌をもちいたアッセイを行った。得られたメンブランベシクルをそのまま解析したところ、興味深いことにそのメンブランベシクルにシグナルの存在による陽性結果が得られた。よって、環境中から分離そして単離された細菌メンブランベシクルに細菌の相互作用に関与するシグナルの存在が示された。
本成果より、環境サンプルからの細胞外マトリクスからのメンブランベシクルの調整および精製技術が確立できたと言える。また、環境サンプルから得られたメンブランベシクルにも細菌シグナルの一種であるアシル化ホモセリンラクトンが存在する事が示された。
以上より、初年度において環境サンプルからのメンブランベシクルの調整・精製手法の構築に十分な目処がたった。また、得られたメンブランベシクルに細菌シグナルが存在する事を示すことに成功した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
環境サンプルからメンブランベシクルの調整・精製手法の構築がなされ、今後の種々環境サンプルからのメンブランベシクルの調整・精製に目処がたった。
さらに、今回の環境サンプルからのメンブランベシクルに細菌シグナルのアシル化ホモセリンラクトンが存在してることが確認出来たため、今後の環境サンプルからのメンブランベシクルの取得とともにそこに細菌シグナルが存在する可能性が高いことが予想される。
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| Strategy for Future Research Activity |
自然界の環境サンプルから細胞外画分を抽出しさらにそこからメンブランベシクルの精製に成功したので、さらに種々の環境サンプルから同様にメンブランベシクルの取得・精製に挑む。そして、得られた環境由来のメンブランベシクルに細菌シグナルが存在するか否かを詳細に調べていく予定である。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
十分な成果が得られ、さらに当初目的を目ざし研究を遂行するため。
引き続き、目的達成のための研究を遂行するため物品費の使用、さらに最終年度における成果発表のための学会参加の旅費等さらに論文投稿料などを計画している。
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[Journal Article] Membrane vesicle formation is associated with pyocin production under denitrifying conditions in Pseudomonas aeruginosa PAO12014
Author(s)
Toyofuku, M., Zhou, S., Sawada, I., Takaya, N., Uchiyama, H., Nomura, N.
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Journal Title
Environ. Microbiol.
Volume: 印刷中
Pages: 印刷中
DOI
Peer Reviewed
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