2015 Fiscal Year Annual Research Report
核形態チェックポイント：核形態異常によりもたらされる核分配停止機構の解明
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25660055
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
井上 善晴 京都大学, (連合)農学研究科(研究院), 准教授 (70203263)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | メチルグリオキサール / Saccharomyces cerevisiae / 核分裂 / DNA損傷チェックポイント / チェックポイントキナーゼ / セキュリン / セパラーゼ / コヒーシン |
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| Outline of Annual Research Achievements |
これまでの解析から、メチルグリオキサール（MG）という解糖系から派生する代謝物で酵母（Saccharomyces cerevisiae）を処理すると、核の形態を成長軸に対して垂直に扁平な形（ジェリービーンズ型核形態と命名）に変形するとともに、娘細胞への核分配を停止することを明らかにして来た。またこの時、ホスファチジルイノシトール分子種のうち、PI(3,5)P2レベルが上昇し、そのことが核分配阻害と相関することを見いだした。
本年度は、MGによる核分配阻害の分子機構を明らかにすることを目的として、核分裂マシナリーへの影響について検討を行った。その結果、S. cerevisiaeをMGで処理すると、核内において損傷DNAに結合するDdc2のfociが観察された。DNAに損傷が生じると、DNA損傷チェックポイントが活性化される。そこで、チェックポイントキナーゼの一つであるChk1のリン酸化状態を調べた結果、MG処理によりChk1のリン酸化が起こった。また、Chk1によりリン酸化されるセキュリン（Pds1）のリン酸化が起こるとともに、その分解も阻害されることを見いだした（セパラーゼの不活性化）。さらに、MG処理によりコヒーシンサブユニットの一つであるScc1のセパラーゼによる切断が阻害された。これらのことから、MGによりDNA損傷チェックポイントが活性化され、姉妹染色分体の分配が阻害されることが、核分配阻害の原因の一つである可能性が示唆された。
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