2014 Fiscal Year Annual Research Report
高度な社会行動評価系樹立を目指したハタネズミ遺伝子変換系の開発
| Project/Area Number |
25660074
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| Research Institution | Tohoku University |
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Principal Investigator |
西森 克彦 東北大学, (連合)農学研究科(研究院), 教授 (10164609)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | オキシトシン受容体 / 平原ハタネズミ / 向社会行動 / 下垂体後葉ホルモン / CRISPR/Cas9 / iPS細胞 / ３胚葉分化 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
①平原ハタネズミ(Voleと略称)iPS細胞の開発とマウス・Vole種間キメラ形成の試み：３胚葉分化能は、以前３因子導入により得たVole.iPS-like細胞のSCIDマウス腎被膜下移植により確認したが、本株に染色体異常が確認され、以後の実験への使用を停止した。新たにVole胎児繊維芽細胞にm3O(改善型Oct3)、mSox2、mkfl4、c-Myc、mLin28m、Nanogの６因子を導入しviPS-like細胞株を樹立した。本株はALP（＋）、分化マーカーのSSEA-1,-3,-4(+)であり、生殖系列細胞へ貢献する可能性やキメラ個体形成能が期待される。本iPS-like細胞の３胚葉分化能は確認していない。種間キメラ形成は、旧来のv.iPS細胞で行ったが、作製には至っていない。並行してCRISPR/Cas9法によるOXTR (オキシトシン受容体)KO Vole作製を開始、大きな前進が得られた（②参照）。
②相同組み替えを利用した、OXTR KO v.iPS細胞とOXTR遺伝子欠損Voleの樹立等に必要なOXTR KOベクター作成とOXTR KO vole作製の実施：米国ハタネズミ研究Consortiumが公開したVole全ゲノムDNA塩基配列からv.OXTR遺伝子塩基配列を得た。OXTR遺伝子破壊Vole作製はCRISPR/Cas9システムにより行う事とし、別に樹立した不死化Vole繊維芽細胞のOXTR遺伝子破壊に取り組み、これを確認した。次に、キメラを経ず直接Vole受精卵にCRISPR/Cas9法を適用、現在まで２匹のOXTR KO候補産仔を得たが、OXTR遺伝子の破壊確認には至っていない。CRISPR/Cas9実験を優先し、Dmrt(-/-)マウスに依るVole精子形成実験は中断している。
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[Journal Article] Double Dissociation of the Roles of Metabotropic Glutamate Receptor 5 and Oxytocin Receptor in Discrete Social Behaviorsm.2015
Author(s)
Mesic,I., Guzman,Y.F., Guedea,A.L., Jovasevic,V., Corcoran,K.A., Leaderbrand,K., Nishimori,K., Contractor,A., and Radulovic.J
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Journal Title
Neuropsychopharmacology
Volume: 印刷中
Pages: 印刷中
Peer Reviewed
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[Journal Article] Role of oxytocin receptors in modulation of fear by social memory.2014
Author(s)
Guzman,Y.F., Tronson,N.C., Jovasevic,V., Sato,K., Ivana Mesic, Guedea,A.L., Nishimori,K. and Radulovic,J.
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Journal Title
Psychopharmacology
Volume: 231
Pages: 2097-2105
DOI
Peer Reviewed
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