2015 Fiscal Year Annual Research Report
着床過程におけるIhhの制御機構と機能の解明：子宮内膜スフェロイドを用いた解析
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25660214
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
山内 伸彦 九州大学, (連合)農学研究科(研究院), 准教授 (00363325)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | Ihh / 子宮内膜 / ウシ / スフェロイド / P4 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
Hedgehogファミリーに属するIndian Hedgehog (Ihh)は着床関連因子の一つであり、ノックアウトマウスにおける研究から着床に必須の因子であることが報告されている。しかし、Ihhの制御機構や具体的な機能については不明な点が多く残されており、特にウシにおける知見はほとんど報告されていない。そこで本研究では、ウシ子宮内膜細胞から三次元多細胞塊であるスフェロイドを作製し、これを生体外モデルとして利用することによりIhhの制御機構と機能を明らかにすることを目的としている。
これまでに、ウシ子宮内膜の腔上皮および腺上皮でIhhが発現していることを免疫染色化学的に明らかとし、黄体期および着床期においてその遺伝子発現が高い値を示すことを示した。また、上皮細胞と間質細胞で構成されるヘテロスフェロイドではP4によってIhh遺伝子の発現が有意に増加した。上皮細胞のみでは効果が認められなかった事から、P4が直接的に上皮細胞のIhh発現を制御しているのではなく、間質細胞を介する制御機構が存在する可能性を示すものであった。
今年度はウエスタンブロッティングによるタンパク質発現の解析を中心に行った。はじめに、生体の子宮組織を用いて卵胞期、黄体期および着床期子宮におけるIhhのタンパク質発現を比較した。その結果、黄体期および着床期で有意に高い値を示した。さらに、ヘテロスフェロイドの培地にP4、HGFおよびFGFをそれぞれ添加し、Ihhタンパク質発現に対する効果を調べた。その結果、P4添加区においてIhhの発現が有意に高い値を示したが、その他の区では変化は認められなかった。
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[Journal Article] Developmental capacity and implantation potential of the embryos with multinucleated blastomeres.2015
Author(s)
Akiyoshi Egashira1, Nobuhiko Yamauchi2, 3, Keiko Tanaka1, Chihiro Mine1, Hitomi Otsubo1, Masao Murakami1, Md. Rashedul Islam2, Misako Ohtsuka1, Naomi Yoshioka1, and Takashi Kuramoto
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Journal Title
J Reprod Dev
Volume: 61
Pages: 595-600
Peer Reviewed / Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
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