2015 Fiscal Year Annual Research Report
GMP reductaseを標的とした新規アフリカ睡眠病治療薬の開発
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25660231
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| Research Institution | Osaka Prefecture University |
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Principal Investigator |
乾 隆 大阪府立大学, 生命環境科学研究科(系), 教授 (80352912)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
石橋 宰 大阪府立大学, 生命環境科学研究科(系), 准教授 (70293214)
西村 重徳 大阪府立大学, 生命環境科学研究科(系), 助教 (90244665)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 人獣共通感染症 / 寄生虫 / 酵素 / 薬剤反応性 / 獣医学 / 有機合成 / X線結晶構造解析 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
プリン核酸アナログ化合物であるmizoribine 5'-monophosphate（MZP）について反応速度論的解析を行い，T. bruceiおよびヒト組換え型GMPRに対するIC50値を求めたところ，TbGMPRでは23.7 uMであったのに対し，ヒトGMPR1およびGMPR2では各々119.9および69.3 uMという結果を得た。これらの結果から，従来のTbGMPR阻害剤であるribavirin 5'-monophosphate（RMP）と比べて，MZPは各種のGMPRに対して高い阻害効率を示すが，種間における選択性の面ではRMPよりも劣ることが判明した。また，血流型T. bruceiの培養系において，RMPの前駆物質であるribavirin が抗原虫作用を有することが明らかとなり， IC50値は25 uMであった。これらの結果をまとめ，2014年度までの成果とともに，PLOS Neglected Tropical Deseasesへ論文を発表した。
一方，立体構造を基にTbGMPR阻害剤を開発するためには，基質であるGMP，あるいはNADPHが結合した酵素複合体の立体構造情報が必要である。活性部位での基質を観察するために，触媒残基であるCys318をAlaに置換することで触媒活性を欠失させた活性欠失変異体を作製した。結晶化条件の探索を行った結果，結晶化母液に0.1 M Tris-HCl(pH8.5)，2 Mリン酸アンモニウムを用い，温度4℃におけるsitting drop蒸気拡散法により構造解析に適した結晶を得ることに成功した。SPring-8 BL38B1において，分解能2.4ÅでX線回折データを収集し，天然型酵素をサーチモデルとした分子置換法で構造モデルを構築することができた。
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Research Products
(37 results)
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[Journal Article] Development of pH-independent drug release formulation using lipocalin-type prostaglandin D synthase.2016
Author(s)
Mizoguchi, M., Nakatsuji, M., Takano, J., Ishibashi, O., Wada, K., Inui, T.
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Journal Title
J. Pharm. Sci.
Volume: 掲載確定
Pages: 1-8
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Novel Characteristics of Trypanosoma brucei Guanosine 5'-monophosphate Reductase Distinct from Host Animals.2016
Author(s)
Bessho, T., Okada, T., Kimura, C., Shinohara, T., Tomiyama, A., Imamura, A., Kuwamura, M., Nishimura, K., Fujimori, K., Shuto, S., Ishibashi, O., Kubata, K., Inui, T.
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Journal Title
PLoS Negl Trop Dis.
Volume: 10(1)
Pages: e0004339
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Nuclear-translocated Glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogenase Promotes Poly(ADP-ribose) Polymerase-1 Activation during Oxidative/Nitrosative Stress in Stroke.2015
Author(s)
Nakajima, H., Kubo, T., Ihara, H., Hikida, T., Danjo, T., Nakatsuji, M., Shahani, N., Itakura, M., Ono, Y., Azuma, Y., Inui, T., Kamiya, A., Sawa, A. and Takeuchi, T.
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Journal Title
J. Biol. Chem.
Volume: 290
Pages: 14493-14503
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Human Lipocalin-Type Prostaglandin D Synthase-Based Drug Delivery System for Poorly Water-Soluble Anti-Cancer Drug SN-38.2015
Author(s)
Nakatsuji, M., Inoue, H., Kohno, M., Saito, M., Tsuge, S., Shimizu, S., Ishida, A., Ishibashi, O., Inui, T.
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Journal Title
PLoS ONE
Volume: 10(11)
Pages: e0142206
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogenase Aggregates Accelerate Amyloid-β Amyloidogenesis in Alzheimer Disease.2015
Author(s)
Itakura, M., Nakajima, H., Kubo, T., Semi, Y., Kume, S., Higashida, S., Kaneshige, A., Kuwamura, M., Harada, N., Kita, A., Azuma, Y. T., Yamaji, R., Inui, T., Takeuchi, T.
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Journal Title
J. Biol. Chem.
Volume: 290
Pages: 26072-26087
DOI
Peer Reviewed
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