2014 Fiscal Year Annual Research Report
デュアルエフェクト応答型タンパク質ラベル化試薬の開発
| Project/Area Number |
25670058
|
|---|
| Research Institution | The University of Tokushima |
|---|
Principal Investigator |
大高 章 徳島大学, ヘルスバイオサイエンス研究部, 教授 (20201973)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2015-03-31
|
| Keywords | タンパク質ラベル化 / チオエステル / ケミカルバイオロジー / N-Sアシル転移 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
リガンド依存的タンパク質ラベル化は、創薬、ケミカルバイオロジー研究に不可欠である。これに用いる従来型試薬は、リガンド－タンパク質相互作用に依存した“濃縮効果”応答性のみが試薬に付与されていた。本研究では、チオエステル前駆体として開発したN-sulfanylethylanilide (SEAlide)の酸塩基触媒依存的活性化とタンパク質を巨大酸塩基触媒と見なすことを基盤とし、“濃縮効果”と“活性化効果”の両者に応答可能な「デュアルエフェクト応答型ラベル化試薬」の開発を昨年度と同様検討した。ラベル化試薬の分子中央にSEAlide骨格を有する分子数種の合成を行い、またリガンドとしては炭酸脱水素酵素に対して結合性を示す低分子有機化合物をリガンドとして利用した。この新規試薬を利用して細胞抽出物中に存在する炭酸脱水素酵素のラベル化を達成した。さらに、質量分析を利用した解析を行い、タンパク質中のラベル化を受けているリジン残基を特定した。これに並行して、炭酸脱水素酵素と低分子化合物結合体の結晶構造データをもとにして修飾残基の妥当性について検証した。なお、本年度の研究遂行を通じて明らかになった問題として、ラベル化に関与する活性基であるチオエステルの反応性が当初の予想に比べ低いことが明らかとなってきた。そこで、現在修飾効率の向上を目指したチオエステル反応性向上に向けた修飾試薬への付加構造の導入について検討を検討を加えている。
|
-
-
-
[Journal Article] Development of a fluoride-responsive amide bond cleavage device that is potentially applicable to a traceable linker2014
Author(s)
J. Yamamoto, N. Maeda, C. Komiya, T. Tanaka, M. Denda, K. Ebisuno, W. Nomura, H. Tamamura, Y. Sato, A. Yamauchi, A. Shigenaga, A. Otaka
-
Journal Title
Tetrahedron
Volume: 70
Pages: 5122-5127
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
-
-
[Journal Article] Development of a traceable linker containing a thiol-responsive amino acid for the enrichment and selective labelling of target proteins2014
Author(s)
J. Yamamoto, N. Maeda, C. Komiya, T. Tanaka, M. Denda, K. Ebisuno, W. Nomura, H. Tamamura, Y. Sato, A. Yamauchi, A. Shigenaga, A. Otaka
-
Journal Title
Org. Biomol. Chem.
Volume: 12
Pages: 3821-3826
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
-
-
-
-
[Presentation] M6P修飾型GM2APの合成検討2015
Author(s)
成瀬 公人, 佐藤 浩平, 坂本 健, 猪熊 翼, 重永 章, 大髙 章
Organizer
日本薬学会第135年会
Place of Presentation
神戸学院大学（兵庫県神戸市）
Year and Date
2015-03-25 – 2015-03-28
-
-
-
-
-
-
[Presentation] 新規タンパク質チオエステル調製法の開発2014
Author(s)
津田 雄介, 重永 章, 傳田 将也, 佐藤 浩平, 北風 圭介, 中村 太寛, 猪熊 翼, 伊藤 孝司, 大髙 章
Organizer
第53回日本薬学会・日本薬剤師会・日本病院薬剤師会中国四国支部学術大会
Place of Presentation
広島国際会議場（広島県広島市）
Year and Date
2014-11-08 – 2014-11-09
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
