2013 Fiscal Year Research-status Report
神経細胞におけるp62/Nbr1分子とリソソームの極性に関する研究
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25670099
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
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| Research Institution | Juntendo University |
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Principal Investigator |
内山 安男 順天堂大学, 医学部, 教授 (10049091)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | オートファゴソーム / p62 / NBR1 / リソソーム / ニューロン |
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| Research Abstract |
私達は、ニューロンに於けるリソソームの局在には極性があること、選択的オートファジーに関わるp62/NBR1にも極性があることを、リソソームカテプシンD（CD）欠損マウス脳のニューロンと初代培養大脳皮質神経細胞を用いて検討した。（１）p62/NBR1、GROD（CD欠損ニューロンに見られるリソソームで、セロイドリポフスチンを蓄える）のin vivoにおける局在化に関する解析：CD欠損マウス脳のニューロンはLC3、ユビキチン、p62とNBR1陽性であることから、凍結免疫電顕法を用いて免疫染色を行い、ユビキチン、p62、NBR1は同一のGRODの膜に局在することが分かった。さらに、光学顕微鏡レベルでp62/NBR1の局在を見ると脳梁や白質の軸索やその終末部には局在しないこと、電顕観察でもGRODは軸索領域には入り込まないことも分かった。（２）初代培養神経細胞を用いたp62/Nbr1局在解析：p62/NBR1の局在を解析するため、E16,17の初代培養大脳皮質ニューロンを用いた。内在性およびp62-GFP,NBR1-GFPともにAnkylin G陽性の軸索初節を超えて、軸索に侵入することはなかった。この局在の分子特性を検討した結果、これらの分子同士が結合するPB1ドメインを欠損し変異p62やcoiled-coilドメインを欠損した変異NBR1は、これらはAnkGを超えて軸索に侵入することが分かった。（３）CD/p62,CD/NBR1,CD/p62/NBR1を欠損するマウスを作成し、大脳皮質V層のニューロン、海馬錐体細胞、小脳プルキンエ細胞でオートファゴソームに取り込まれるGRODの両を計測した。その結果、トリプル欠損マウス脳ではGRODを含むオートファゴソームはほとんど見られないことが分かった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
1: Research has progressed more than it was originally planned.
Reason
ほぼ予定通り、解析が進み、上記結果をまとめて論文を作成中である。
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| Strategy for Future Research Activity |
リソソームは、初代培養皮質ニューロンの培養７日目をすぎると軸索にはほとんど局在が見られなくなる。この局在の分子機構を解析する。現在、リソソーム膜タンパク質の細胞質側のドメインをGFPと結合したキメラタンパク質を作成し、この局在について検討を進めている。
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[Journal Article] SGLT2 selective inhibitor ipragliflozin reduces body fat mass by increasing fatty acid oxidation in high-fat diet-induced obese rats.2014
Author(s)
Yokono M, Takasu T, Hayashizaki Y, Mitsuoka K, Kihara R, Muramatsu Y, Miyoshi S, Tahara A, Kurosaki E, Li Q, Tomiyama H, Sasamata M, Shibasaki M, Uchiyama Y
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Journal Title
Eur J Pharmacol
Volume: 727
Pages: 66-74
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Inhibitory effect of the selective secretion 5-HT receptor antagonist ramosetron on duodenal acidification-induced gastric hypersensitivity in rats.2014
Author(s)
Nakafuku-Fukuda, M., Hirata, T., Keto, Y., Yamano, M., Yokoyama, T., Uchiyama, Y.
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Journal Title
Eur J Pharmacol
Volume: -
Pages: -
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] NF-Y inactivation causes atypical neurodegeneration characterized by ubiquitin and p62 accumulation and endoplasmic reticulum disorganization.2014
Author(s)
Yamanaka, T., Tosaki, A., Kurosawa, M., Matsumoto, G., Koike, M., Uchiyama, Y., Maity, S.N., Shimogori, T., Hattori, N., *Nukina, N.
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Journal Title
Nat Commun
Volume: -
Pages: -
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Deregulation of Pancreas-Specific Oxidoreductin ERO1β in the Pathogenesis of Diabetes Mellitus.2014
Author(s)
Awazawa, M., Futami, T., Sakada, M., Kaneko, K., Ohsugi, M., Nakaya, K., Terai, A., Suzuki, R., Koike, M., Uchiyama, Y., Kadowaki, T., Ueki, K.
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Journal Title
Mol Cell Biol
Volume: -
Pages: -
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Generation and analysis of serine protease inhibitor Kazal type 3-Cre driver mice.2014
Author(s)
Sakata, K., Ohmuraya, M., Araki, K., Suzuki C, Ida S, Hashimoto D, Wang J, Uchiyama Y, Baba H, *Yamamura K
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Journal Title
Exp Animals
Volume: 63
Pages: 45-53
Peer Reviewed
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[Journal Article] Local apoptosis modulates early mammalian brain development through the elimination of morphogen-producing cells.2013
Author(s)
Nonomura, K., Yamaguchi, Y., Hamachi, M., Koike, M., Uchiyama, Y., Nakazato, K., Mochizuki, A., Sakaue-Sawano, A., Miyawaki, A., Yoshida, H., Kuida, K., *Miura, M.
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Journal Title
Dev Cell
Volume: 27
Pages: 621-634
Peer Reviewed
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[Journal Article] Exendin-4 improves beta cell function in autophagy-deficient beta cells.2013
Author(s)
Abe, H., Uchida, T., Hara, A., Mizukami, H., Komiya, K., Koike, M., Shigihara, N., Toyofuku, Y., Ogihara, T., Uchiyama, Y., Yagihashi, S., Fujitani, Y., Watada, H.
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Journal Title
Endicrinology
Volume: 154
Pages: 4512-4524
Peer Reviewed
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[Journal Article] Immunocytochemical study of the autophagy marker microtubule-associated protein 1 light chain 3 in normal and steatotic human livers.2013
Author(s)
Kashima, J., Shintani-Ishida, K., Nakajima, M., Maeda, H., Unuma, K., Uchiyama, Y., *Yoshida, K.
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Journal Title
Hepatology Research
Volume: -
Pages: -
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Tuberin activates and controls the distribution of Rac1 via association with p62 and ubiquitin through the mTORC1 signaling pathway.2013
Author(s)
Okura, H., Kobayashi, T., Koike, M., Ohsawa, M., Zhang, D., Arai, H., Uchiyama, Y., *Hino O
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Journal Title
Int J Oncol
Volume: 43
Pages: 447-456
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Enrichment of GABARAP relative to LC3 in the axonal initial segments of neurons.2013
Author(s)
Koike, M., Tanida, I., Nanao, N., Tada, N., Iwata, J., Ueno, T., Kominami, E., *Uchiyama, Y.
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Journal Title
PLos One
Volume: 8
Pages: e63568
Peer Reviewed
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[Journal Article] ATP13A2 deficiency induces a decrease in cathepsin D activity, fingerprint-like inclusion body formation, and selective degeneration of dopaminergic neurons.2013
Author(s)
Matsui, H., #Sato, F., Sato, S., Koike, M., Taruno, Y., Saiki, S., Funayama, M., Ito, H., Taniguchi, Y., Uemura, N., Toyoda, A., Sakaki, Y., Takeda, S., Uchiyama, Y., Hattori, N., *Takahashi, R.
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Journal Title
FEBS letters
Volume: 9
Pages: 1316-25
Peer Reviewed
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[Journal Article] Lysosomal storage and advanced senescence in the brain of LAMP-2-deficient Danon disease.2013
Author(s)
Furuta, A., Wakabayashi, K., Haratake, J., Kikuchi, H., Kabuta, T., Mori, F., Tokonami, F., Katsumi, Y., Tanioka, F., Uchiyama, Y., Nishino, I., Wada, K.
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Journal Title
Acta Neuropathol
Volume: 125
Pages: 459-461
Peer Reviewed
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[Journal Article] Differences in expression patterns of cathepsin C/dipeptidyl peptidase I in normal, pathological and aged mouse central nervous systems.2013
Author(s)
Koike, M., Shibata, M., Ezaki, J., Peters, C., Saftig, P., Kominami, E., Uchiyama, Y.
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Journal Title
Eur J Neurosci
Volume: 37
Pages: 816-830
Peer Reviewed
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