乳癌病理組織検体を用いてエストロゲン受容体ヘテロ/ホモダイマーの検出は可能か否か

2014 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 25670174
• Research Institution: Tohoku University
• Principal Investigator: 笹野 公伸 東北大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (50187142)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2015-03-31
• Keywords: 乳癌 / エストロゲン受容体 / 近接ライゲーションアッセイ

Outline of Annual Research Achievements

乳癌はエストロゲン依存性増殖を症例が多く、エストロゲン受容体（ER）が治療標的因子の一つとして確立されてきた。ERは二量体を形成することでその作用を発揮する。しかしこれまでに病理組織標本上でこの二量体の形成を直接で観察する手段がなかった。近接ライゲーション法は、近接（＜40nm）している二つのタンパクを検出することができ、近年、タンパク相互作用を観察する目的で開発された技術である。本研究はこの近接ライゲーション法を応用し、ER二量体の存在を可視化する技術を構築した。
乳癌培養細胞と乳癌組織においてPLAを施行し、ERのダイマーを示すドットを蛍光顕微鏡にて検出した。乳癌培養細胞ではエストロゲン依存性株を用い、エストロゲン添加時のダイマーパターンを確認した。その結果、エストロゲン添加によって核内にERαホモダイマー (α/α)、ERヘテロダイマー (α/β) をそれぞれ検出することができた。また、これらダイマーを示すシグナルは、ICI 182,780の添加によって抑制された。また、乳癌組織を用いた検討では25症例の検体を用いてPLA法を施行し核内のダイマーのドット数を計測し、バイオマーカーとの関連を検討した。その結果、乳癌細胞1個当たりのERαのホモダイマーの数はERα、PgR (progesterone receptor) の標識率 (LI: labeling index) と有意な正の相関を示し、Ki67のLIとは有意な負の相関を示した。以上、本研究により初めてERのダイマーを病理組織標本上で可視化して評価することができた。今後さらに多くの乳癌臨床検体を用いてERダイマーの意義を明らかにすることで、そのパターンの解析が乳癌診断に貢献できる可能性が強く示唆された。

Research Products

• [Journal Article] Intratumoral androgen metabolism and actions in invasive lobular carcinoma of the breast. (2014)
  • Author(s): Yoda T, McNamara KM, Miki Y, Takagi M, Rai Y, Ohi Y, Sagara Y, Tamaki K, Hirakawa H, Ishida T, Suzuki T, Ohuchi N, Sasano H.
  • Journal Title: Cancer Sci. Volume: 105(11) Pages: 1503-1509
  • DOI: 10.1111/cas.12535.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Correlation of tumor-infiltrative lymphocyte subtypes alteration with neoangiogenesis before and after neoadjuvant chemotherapy treatment in breast cancer patients. (2014)
  • Author(s): Chan MS, Chen SF, Felizola SJ, Wang L, Nemoto N, Tamaki K, Ishida T, Chow LW, Ohuchi N, Sasano H.
  • Journal Title: Int J Biol Markers. Volume: 29(3) Pages: 193-203
  • DOI: 10.5301/jbm.5000082.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Aryl hydrocarbon receptor in breast cancer—a newly defined prognostic marker. (2014)
  • Author(s): Saito R, Miki Y, Hata S, Takagi K, Iida S, Oba Y, Ono K, Ishida T, Suzuki T, Ohuchi N, Sasano H.
  • Journal Title: Horm Cancer. Volume: 5(1) Pages: 11-21
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Analysis of clinically relevant values of Ki-67 labeling index in Japanese breast cancer patients. (2014)
  • Author(s): Tamaki K, Ishida T, Tamaki N, Kamada Y, Uehara K, Miyashita M, Amari M, Tadano-Sato A, Takahashi Y, Watanabe M, McNamara K, Ohuchi N, Sasano H.
  • Journal Title: Breast Cancer. Volume: 21(3) Pages: 325-333
  • DOI: 10.1007/s12282-012-0387-5.
  • Peer Reviewed
• [Presentation] エストロゲンレセプターダイマーの発現局在の可視化とパターン解析 (2014)
  • Author(s): 岩渕英里奈、三木康宏、小野寺好明、小野克彦、鈴木 貴、笹野公伸
  • Organizer: 第55回日本組織細胞化学会総会･学術集会
  • Place of Presentation: 松本市中央公民館（松本市）
  • Year and Date: 2014-09-27 – 2014-09-28
• [Presentation] Detection of estrogen-induced dimerization patterns of estrogen receptor in breast carcinoma cells (2014)
  • Author(s): 岩渕英里奈、三木康宏、小野寺好明、小野克彦、笹野公伸
  • Organizer: 第73回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜（横浜市）
  • Year and Date: 2014-09-25 – 2014-09-27
• [Presentation] S100A7 in breast carcinoma invasion into adipose tissue (2014)
  • Author(s): 櫻井美奈子、三木康宏、鈴木貴、笹野公伸
  • Organizer: 第73回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜（横浜市）
  • Year and Date: 2014-09-25 – 2014-09-27
• [Presentation] 11β-Prostaglandin F2α produced by AKR1C3 stimulates FPreceptor and contributes to breast cancer progression (2014)
  • Author(s): 依田智美、Keely M McNAMARA 、三木康宏、髙木清司、鈴木貴、笹野公伸
  • Organizer: 第73回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜（横浜市）
  • Year and Date: 2014-09-25 – 2014-09-27
• [Presentation] ステロイドホルモン合成酵素AKR1C3は11β-Prostaglandin F2αの産生に寄与し,乳癌の悪化に関わる (2014)
  • Author(s): 依田智美、McNamara M. Keely、三木康宏、髙木清司、鈴木 貴、石田孝宣、大内憲明、笹野公伸
  • Organizer: 第15回ホルモンと癌研究会
  • Place of Presentation: 艮陵会館（仙台市）
  • Year and Date: 2014-07-04 – 2014-07-05
• [Presentation] 乳癌微小環境における27-hydroxy cholesterol合成酵素の発現 (2014)
  • Author(s): 石際康平、櫻井美奈子、三木康宏、石田孝宣、大内憲明、笹野公伸
  • Organizer: 第15回ホルモンと癌研究会
  • Place of Presentation: 艮陵会館（仙台市）
  • Year and Date: 2014-07-04 – 2014-07-05
• [Presentation] 乳癌におけるheterogeneous nuclear ribonucleoprotein K の発現意義 (2014)
  • Author(s): 岩渕英里奈、三木康宏、増田真理子、柴原裕紀子、鈴木 貴、笹野公伸
  • Organizer: 第103回日本病理学会総会
  • Place of Presentation: 広島国際会議場（広島市）
  • Year and Date: 2014-04-24 – 2014-04-26