2015 Fiscal Year Annual Research Report
被虐待児の脳におけるDNAメチル化とその神経発達への影響に関する検討
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25670340
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| Research Institution | Gunma University |
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Principal Investigator |
小湊 慶彦 群馬大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (30205512)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
中島 たみ子 群馬大学, 医学(系)研究科(研究院), 研究員 (40008561) [Withdrawn]
佐野 利恵 群馬大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (70455955)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 法医学 / 子どもの虐待 / DNAメチル化 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
平成27年度は、虐待死亡例及び同年齢の内因性急死例の解剖時に保存された脳から、大脳皮質、海馬、扁桃体、小脳等についてパラフィン包埋切片を作製した。左右海馬からZEISS社製PALMレーザーマイクロダイセクションシステムを利用して、神経細胞層を特異的に切り出し、そこからQIAamp DNA FFPE Tissue Kit(QIAGEN社)を用いてDNAを抽出し、そのDNAにEpiTect Bisulfite Kit（QIAGEN社)を用いてバイサルファイト処理を施し、プロモーター１Fを標的にPCRを行い、PCR産物をクローニングベクターpUC118に組み込み、各クローンの塩基配列を調べることでメチル化の検索を行った。
結果は、虐待例の海馬で24アリルを調べたところ、左海馬では12アリル中の5アリル、右海馬では12アリル中の7アリルにメチル化が認められた。ほとんどのメチル化部位は転写因子NGFI-Aの認識配列に位置し、2箇所以上のメチル化を有するアリルが5アリルあった。一方、内因性急死2例を調べた。一例では左海馬8アリル中の2アリル、右海馬11アリル中の１アリルにメチル化が認められた。調べた範囲で2箇所以上のメチル化を有するアリルは無かった。他方、左海馬16アリル中の全アリルにメチル化が認められたが、そのメチル化部位は一箇所であり、その他にメチル化をもつアリルは3アリルであった。調べた範囲で、全アリルで見つかったメチル化を除くと、2箇所以上のメチル化を有するアリルは無かった。但し、内因性急死例のメチル化部位は転写因子NGFI-Aの認識配列に位置していなかった。
以上から、非虐待例に比較して虐待例では海馬のDNAメチル化が増加しており、特に転写因子NGFI-Aの認識配列にメチル化が存在することが特異的であった。
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[Journal Article] A 3.0-kb deletion including an erythroid cell-specific regulatory element in intron 1 of the ABO blood group gene in an individual with the Bm phenotype.2015
Author(s)
Sano R, Kuboya E, Nakajima T, Takahashi Y, Takahashi K, Kubo R, Kominato Y, Takeshita H, Yamao H, Kishida T, Isa K, Ogasawara K, Uchikawa M.
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Journal Title
Vox Sang
Volume: 108
Pages: 310-313
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Blood group B gene is barely expressed in in vitro erythroid culture of Bm-derived CD34+ cells without an erythroid cell-specific regulatory element.2015
Author(s)
Sano R, Nogawa M, Nakajima T, Takahashi Y, Takahashi K, Kubo R, Kominato Y, Yokohama A, Tsukada J, Yamao H, Kishida T, Ogasawara K, Uchikawa M.
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Journal Title
Vox Sang
Volume: 108
Pages: 302-309
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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