線維芽細胞から直接に表皮角化細胞を誘導する試み

2013 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 25670500
• Research Category: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• Research Institution: Dokkyo Medical University
• Principal Investigator: 佐藤 仁美 獨協医科大学, 医学部, 助教 (00648090)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2015-03-31
• Keywords: iPS細胞 / 表皮角化細胞

Research Abstract

1.ヒトiPS細胞のおいてkeratin遺伝子にeGFP遺伝子をノックインする
表皮角化細胞への分化誘導を厳密にチェックしながら研究を遂行していくことを考え、以下のような仕組みをつくる。ヒトのiPS細胞において、内在性のK5あるいはK14遺伝子に、インフレームでeGFP遺伝子をノックインする。この際に、人工ヌクレアーゼ（TALENsを想定している）を利用する。こうすることによって、iPS細胞が角化細胞に分化しK5/K14遺伝子がONになってくると、GFPの蛍光発色も同時に観察されることになる。GFPの発現強度は、内在性のプロモーターに依存することになるため、蛍光強度でkeratin遺伝子の発現の程度に見当をつけることも可能である。このような仕組みをもつヒトiPS細胞を実際に表皮角化細胞に分化させることによって予想通りGFPの蛍光が観察できるかどうか、などの確認を行う。
2.ヒトiPS細胞からヒト表皮角化細胞の分化とそれにかかわる遺伝子（群）の選定
本年度の研究遂行予定としては、上記の①と②を挙げていた。①については、遂行した。ただし、当初の予定よりこの部分（とくに、TALENsの作成、レポーターベクターの作成）に時間がかかってしまったため、②まで実験の進行が及ばなかった。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

当初の予定より、技術的な理由と、主任研究者の所属が変更したことによりやや遅れている状況である。

Strategy for Future Research Activity

本来の予定通り施行予定である。
ただし、上記により、予定よりはやや遅れたスケジュールであるため、なるべくスピードアップをはかるよう努力する。