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2015 Fiscal Year Annual Research Report

肝臓全細胞置換によるヒト化動物モデルの開発

Research Project

Project/Area Number 25670589
Research InstitutionOsaka City University

Principal Investigator

池田 一雄  大阪市立大学, 大学院医学研究科, 教授 (80275247)

Project Period (FY) 2013-04-01 – 2016-03-31
Keywords肝細胞 / iPS細胞 / 肝星細胞 / 肝臓基質
Outline of Annual Research Achievements

本研究において、ラット肝臓、マウス肝臓を界面活性剤(0.5%SDS)を含む溶液で穏やかに還流し、細胞成分を完全に除去し、肝臓の微細形態を保持した[肝臓基質]を作製し、この肝臓基質にiPS細胞由来ヒト肝細胞還流によって移植し、生着させ肝臓基質の再細胞化を目標に、実験を行った。
1)「肝臓基質」作製;ラット肝臓、マウス肝臓を用い、ex-vivo閉鎖系(体外循環系)で培養可能となるように動物の門脈と胸部下大静脈にカニュレーションを行い、0.5%SDSを含む溶液で穏やかに還流し、細胞成分を完全に除去し、肝臓裏面の腹部下大静脈を閉鎖した。これによってex-vivo閉鎖系の肝臓基質を作製することができた。2)iPS細胞から肝細胞への分化誘導の効率化;ヒトiPS細胞を、ActivinA 100 ng/ml添加したRPMI Medium1690+B27 supplement中で、37℃、5%CO2、4%O2条件下で5日間培養し、増殖因子を20ng/ml HGFに変更し、引き続き低酸素条件下で5日間培養した。その後、20ng/ml OSMとHCM Single Quotsを添加したHepatocyte Basal Mediumで37℃、5%CO2条件下で5日間培養することにより、肝細胞へと分化誘導させた。さらに、ウイルスベクターによる遺伝子導入、フィーダー細胞としての肝星細胞の利用やGHをもちいることでALBの発現増加がみられた。3)「肝臓基質」再細胞化;「肝臓基質」でのiPS細胞由来肝細胞と星細胞の混合培養を行ったが、ALBとCYP3の発現からは、有意差をもって、肝星細胞の共培養が有効であるという結果には至らなかった。

  • Research Products

    (3 results)

All 2015

All Journal Article (1 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Peer Reviewed: 1 results) Presentation (2 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results)

  • [Journal Article] Efficient engraftmentof human iPS cell-derived hepatocyte-like cells in uPA/SCID mice by overexpression of FNK, a Bcl-x(L)mutant gene.2015

    • Author(s)
      Nagamoto Y, Takayama K, Tashiro K, Tateno C, Sakurai F, Tachibana M, Kawabata K, Ikeda K, Tanaka Y, Mizuguchi H.
    • Journal Title

      Cell Transplant.

      Volume: 24 Pages: 1127-1138

    • DOI

      10.3727

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Presentation] Characterization of senescence-associated hepatic stellate cells using human primary culture cells2015

    • Author(s)
      Odagiri N., Matsubara T., Kawada N., Ikeda K.
    • Organizer
      18th INTERNATIONAL SYMPOSIUM ON CELLS OF THE HEPATIC SINUSOID
    • Place of Presentation
      Asilomar, California, USA
    • Year and Date
      2015-11-11 – 2015-11-13
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Enhanced endoplasmic reticulum stress response has a protective role in acetaminophen-induced liver injury in mice2015

    • Author(s)
      Sogabe N., Matsubara T., Teranishi Y., Nakatani K., Kawada N., Ikeda K.
    • Organizer
      18th INTERNATIONAL SYMPOSIUM ON CELLS OF THE HEPATIC SINUSOID
    • Place of Presentation
      Asilomar, California, USA
    • Year and Date
      2015-11-11 – 2015-11-13
    • Int'l Joint Research

URL: 

Published: 2017-01-06  

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