2015 Fiscal Year Annual Research Report
自然免疫支配下のT細胞の存在意義の追求‐なぜ肝障害を制御できるのか？‐
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25670590
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| Research Institution | The Tazuke Kofukai |
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Principal Investigator |
寺嶋 宏明 公益財団法人田附興風会, 医学研究所 第1研究部, 研究主幹 (40314215)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
内田 洋一朗 公益財団法人田附興風会, 医学研究所 第1研究部, 主任研究員 (30597745)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 虚血再還流障害 / 肝臓 / galectin-9 / T細胞 / TIM-3 / TLR-4 / マクロファージ |
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| Outline of Annual Research Achievements |
自然免疫支配を受ける肝虚血再灌流障害(IRI)におけるT細胞とﾏｸﾛﾌｧｰｼﾞのcross-talkの調整機構を解明すべく本研究に着手した。galectin-9(gal-9)の生体内での保護作用としての機能を、まず血中/組織内のgal-9発現の経時的変化を明らかにし、外因性gal-9投与の有効性につきvivoで実証することができた。この新しい知見を一旦まとめる方針として、前年度末に海外雑誌Liver transplantationへの投稿に至った。査読結果に基づき、再検討の上、再投稿したことで受理され、主に肝IRIにおけるgal-9にfocusを置いた成果を論文としてまとめることができた。
gal-9はTim-3 ligandとして報告されており、さらなる機能解明を目的としてTim-3(T細胞上に発現)に着眼して検討予定としていた。Tim-3ﾉｯｸｱｳﾄ(KO)（正確にはmutant）ﾏｳｽの入手（米国ｼﾞｬｸｿﾝ研究所より有償分与）に予想以上に時間を要した。無事ﾁｬｰﾙｽﾞﾘﾊﾞｰ社を介して当研究所に搬送され、現在breedingを行っており、最終年度の年度末にようやく使用可能な状況になった。Tim-3KOﾏｳｽにおける研究が遅延する可能性が出てきたために、得られたﾃﾞｰﾀをもとにしてまず論文化に踏み切ったのも理由の一つである。
また、Tim-3発現を検証するために免疫染色を施行したが同定は困難でありFACS解析した。ﾏｳｽIRIﾓﾃﾞﾙを作成し末梢血を採取しTim-3発現を検討すると、CD4(+)細胞ではなくCD4(-)細胞にてTIM-3発現を認め、これらはCD11b陽性を示した。Tim-3発現がCD4(+)細胞のみならずﾏｸﾛﾌｧｰｼﾞ、ｸｯﾊﾟｰ細胞においても発現していることを示唆しており、脾臓を分離して解析を行っている。
引き続きTIM-3KOﾏｳｽにおけるgal-9の作用解析を行っていく次第であり、FACS解析結果を踏まえて、得られた知見を次の論文として報告したい。
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