2014 Fiscal Year Annual Research Report
骨系統疾患治療薬の開発に向けたsFRP1およびb-cateninの機能解析
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25670852
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| Research Institution | Tokyo Medical University |
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Principal Investigator |
古賀 陽子 東京医科大学, 医学部, 講師 (10392408)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
岡安 麻里 東京大学, 医学部附属病院, 特任臨床医 (10610941)
倉林 くみ子 東京大学, 医学部附属病院, 特任臨床医 (40586757)
菅野 勇樹 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (80451813)
稲木 涼子 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (90632456)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | ｓFRP1 / ｂ－catenin / Wnt |
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| Outline of Annual Research Achievements |
《目的》中枢神経系が骨形成、骨代謝、および骨量を制御していることに着目し、中枢神経系の胚発生の段階で重要な役割を果たすWnt/b-cateninシグナル伝達経路とその拮抗タンパク質であるsFRP1との関連を明らかにするとともに、骨におけるWnt/b-cateninとsFRP1の作用機序の解明を目的とした。
《結果》前年度のin vitroの結果を踏まえ、最終年度は、大脳質および骨におけるsFRP1およびｂ－cateninのin vivoでの機能解析を行うことを目的とし、下記のように行った。
1.sFRP1およびｂ－cateninのgain of function(機能獲得）の検討：①大脳皮質への遺伝子導入（エレクトロポレーション）；CMV-actinプロモーターにsFRP1-GFPのプラスミドを作製し、マウスE12.5日の大脳皮質へ遺伝子導入を行い、E15.5日目およびE17.5日目に解析を行った。その結果、GFP陽性細胞がコントロール群と比較してVZからpialに向かいよりmigrationしていることが確認できた。②骨組織への解析は行えなった。
2.sFRP1およびｂ－cateninのloss of function(機能喪失）の検討：①大脳皮質への遺伝子導入（エレクトロポレーション）；U6プロモーターにsFRP1-RNAi-GFPのプラスミドを作製し、マウスE12.5日の大脳皮質へ遺伝子導入を行い、E15.5日目およびE17.5日目に解析を行った。その結果、コントロール群と比較してVZからpialの方向に反するかのように極性を欠いたGFP陽性細胞が確認できた。②骨組織への十分な解析は行えなった。以上の結果より、sFRP1は神経細胞の遊走に作用することが示唆された。
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