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2015 Fiscal Year Annual Research Report

生細胞内RNAの可視化と制御を実現する革新的技術の創出

Research Project

Project/Area Number 25708025
Research InstitutionThe University of Tokyo

Principal Investigator

吉村 英哲  東京大学, 理学(系)研究科(研究院), 助教 (90464205)

Project Period (FY) 2013-04-01 – 2016-03-31
KeywordsRNA / イメージング / 1分子観察 / テロメア
Outline of Annual Research Achievements

本研究では、申請者らのグループが開発した新規RNAプローブを用いた生細胞内1分子RNAイメージング法を用いて、現在注目されている非翻訳性RNAの生細胞内可視化解析を行なうことを目的としている。平成26年度中に目的RNAであるテロメア繰り返し配列含有RNA(telomere repeat containing RNA: TERRA)の生細胞内1分子可視化に成功していた。平成27年度は、前年に得られたTERRAの可視化結果を元にTERRAの動態解析を行なった。また、TERRAと協働して働くと言われているタンパク質hnRNPA1との同時1分子観察行い、動態の相関について解析した。
U2OS細胞内のTERRAとテロメアを標識し、生細胞1分子観察を行なったところ、テロメアから1~2μmほど離れた領域にTERRAが集中していることが明らかとなった。また、その領域では、拡散係数が固定細胞内と同程度に小さなTERRAがより多く検出された。続いて、TERRA、テロメア、hnRNPA1の3色同時1分子観察を行なった。その結果から、特にテロメアから1~2μmほど離れた領域でTERRAとhnRNPA1は共局在すること、共局在が生じるに当たって静的なTERRAにhnRNPA1が拡散運動でやってきて共局在すること、この領域でTERRAとhnRNPA1が共局在を形成している場合その中心にあるテロメア上ではhnRNPA1の存在量が減少していることを明らかにした。以上の結果から、TERRAはテロメアから離れた領域でhnRNPA1を捕捉することで、テロメア長調節におけるhnRNPA1の機能を制御しているというモデルを得た。本モデルは、TERRAはテロメア上で機能するという従来の既成概念を覆す、革新的なものである。

Research Progress Status

27年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

27年度が最終年度であるため、記入しない。

Causes of Carryover

27年度が最終年度であるため、記入しない。

Expenditure Plan for Carryover Budget

27年度が最終年度であるため、記入しない。

  • Research Products

    (12 results)

All 2016 2015

All Journal Article (3 results) (of which Peer Reviewed: 2 results) Presentation (9 results) (of which Int'l Joint Research: 5 results,  Invited: 1 results)

  • [Journal Article] Genetically Encoded Fluorescent Probe for Imaging Apoptosis in Vivo with Spontaneous GFP Complementation2016

    • Author(s)
      Yusuke Nasu, Yoichi Asaoka, Misako Namae, Hiroshi Nishina, Hideaki Yoshimura, Takeaki Ozawa
    • Journal Title

      Analytical Chemistry

      Volume: 88 Pages: 838-844

    • DOI

      10.1021/acs.analchem.5b03367

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Development of red-shifted mutants derived from luciferase of Brazilian click beetle Pyrearinus termitilluminans2015

    • Author(s)
      Tomoki Nishiguchi, Toshimichi Yamada, Yusuke Nasu, Mashiho Ito, Hideaki Yoshimura, Takeaki Ozawa
    • Journal Title

      Journal of Biomedical Optics

      Volume: 20 Pages: 101205

    • DOI

      10.1117/1.JBO.20.10.101205.

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] RNAと生細胞内1分子イメージングの可能性2015

    • Author(s)
      吉村英哲
    • Journal Title

      Labcab

      Volume: 12 Pages: 19-20

  • [Presentation] Analysis of single molecule dynamic to reveal the functional mechanism of telomeric repeat-containing RNA2016

    • Author(s)
      YOSHIMURA, Hideaki; YAMADA, Toshimichi; OZAWA, Takeaki
    • Organizer
      第95日本化学会春季年会
    • Place of Presentation
      同志社大学京田辺キャンパス(京都府・京田辺市)
    • Year and Date
      2016-03-24 – 2016-03-27
  • [Presentation] SINGLE-MOLECULE LIVE-CELL IMAGING OF A NON-CODING RNA2016

    • Author(s)
      Hideaki Yoshimura, Toshimichi Yamada, Rintaro Shimada, Takeaki Ozawa
    • Organizer
      Focus on Microscopy 2016
    • Place of Presentation
      台北(台湾)
    • Year and Date
      2016-03-20 – 2016-03-23
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Development of a genetically-encoded probe to visualize β-actin mRNA in living cells based on a reconstituted GFP and an RNA binding domain PUM-HD2015

    • Author(s)
      Hideaki Yoshimura, Toshimichi Yamada, Takeaki Ozawa
    • Organizer
      Pacifichem2015
    • Place of Presentation
      Honolulu (U.S.)
    • Year and Date
      2015-12-15 – 2015-12-20
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] A fluorescent probe for single-molecule live-cell imaging of telomeric-repeat containing RNA using fluorescent protein reconstitution and an RNA-binding domain PUM-HD2015

    • Author(s)
      Hideaki Yoshimura, Toshimchi Yamada, Rintaro Shimada, Takeaki Ozawa
    • Organizer
      Pacifichem2015
    • Place of Presentation
      Honolulu (U.S.)
    • Year and Date
      2015-12-15 – 2015-12-20
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Single molecule imaging of telomeric-repeat containing RNA in living cells2015

    • Author(s)
      Hideaki Yoshimura, Toshimichi Yamada, Takeaki Ozawa
    • Organizer
      9th International Symposium on Nanomedicine
    • Place of Presentation
      三重大学(三重県・津市)
    • Year and Date
      2015-12-10 – 2015-12-12
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] Single molecule imaging of telomeric repeat containing RNA in living cells2015

    • Author(s)
      Hideaki Yoshimura, Toshimichi Yamada, Hiroki Segawa, Takeaki ozawa
    • Organizer
      第53回生物物理学会
    • Place of Presentation
      金沢大学 角間キャンパス(石川県・金沢市)
    • Year and Date
      2015-09-13 – 2015-09-15
  • [Presentation] テロメアRNA生細胞内1分子動態の定量評価法2015

    • Author(s)
      吉村英哲、山田俊理、瀬川尋貴、小澤岳昌
    • Organizer
      分析化学会第64年会
    • Place of Presentation
      九州大学伊都キャンパス(福岡県・福岡市)
    • Year and Date
      2015-09-09 – 2015-09-11
  • [Presentation] Analysis of dynamics on a non-coding RNA in living cells using a single molecule tracking approach2015

    • Author(s)
      Hideaki Yoshimura, Toshimichi Yamada, Hiroki Segawa, Takeaki Ozawa
    • Organizer
      JASIS RSC Tokyo international conference
    • Place of Presentation
      幕張メッセ(千葉県・千葉市)
    • Year and Date
      2015-09-03 – 2015-09-04
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 細胞内1分子動態分析に基づくテロメアRNAの作動機構解析法2015

    • Author(s)
      吉村英哲、山田俊理、瀬川尋貴、小澤岳昌
    • Organizer
      第75回分析化学討論会
    • Place of Presentation
      山梨大学(山梨県・甲府市)
    • Year and Date
      2015-05-23 – 2015-05-24

URL: 

Published: 2017-01-06  

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