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2013 Fiscal Year Annual Research Report

スプライシング異常による未成熟mRNAの蓄積を防ぐチェックポイント機構の解析

Research Project

Project/Area Number 25711001
Research Category

Grant-in-Aid for Young Scientists (A)

Research InstitutionUniversity of Toyama

Principal Investigator

甲斐田 大輔  富山大学, 先端ライフサイエンス拠点, 特命助教 (60415122)

Project Period (FY) 2013-04-01 – 2017-03-31
Keywordsスプライシング / 転写
Research Abstract

現在までに、スプライシング阻害が転写伸長を抑制することを明らかにしたが、転写が停止する正確な遺伝子上の位置は明らかになっていない。そこで、スプライシング阻害剤であるスプライソスタチンA(SSA)によりスプライシングを阻害した後、クロマチン免疫沈降法によりRNAポリメラーゼIIの停止位置を明らかにすることで、転写が停止する正確な位置を解析したところ、Pol IIが遺伝子特異的に遺伝子5’末端に近い部分で停止していることが明らかとなった。さらに、リン酸化Pol II特異的な抗体を用いてクロマチン免疫沈降実験を行なったところ、遺伝子特異的なPol IIの脱リン酸化が観察された。
これらのことから、スプライシングが阻害されることにより、遺伝子特異的なPol IIの脱リン酸化が起こり、その結果、遺伝子特異的な転写伸長抑制、ならびに3’末端の発現低下が起こると考えられる。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

研究計画通り、転写伸長が停止しているおおよその位置を明らかに出来、さらにその原因が、遺伝子特異的なPol IIの脱リン酸化であることを示唆するデータを得られたため。
また、転写伸長停止に関する論文を発表することができたため。

Strategy for Future Research Activity

今後は、研究計画に従い、スプライシングがPol IIの脱リン酸化を引き起こすメカニズムを解析する予定である。

Expenditure Plans for the Next FY Research Funding

研究支援員の雇用計画を変更したことと、実験消耗品にかかる金額が予想より少なかったため。
研究支援員の人件費として使用する予定。

  • Research Products

    (3 results)

All 2014 2013

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results) Presentation (2 results)

  • [Journal Article] U2 snRNP is required for expression of the 3’ end of genes2014

    • Author(s)
      Mitsunori Koga, Takayuki Satoh, Ichiro Takasaki, Yumi Kawamura, Minoru Yoshida and Daisuke Kaida
    • Journal Title

      PLOS ONE

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0098015

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] U2 snRNP is required for the phosphorylation of CTD Ser2 and efficient transcription elongation2013

    • Author(s)
      Daisuke Kaida, Mitsunori Koga
    • Organizer
      Cold Spring Harbor Laboratory meeting “Eukaryotic mRNA processing”
    • Place of Presentation
      Cold Spring Harbor Laboratory
    • Year and Date
      20130820-20130824
  • [Presentation] スプライシング異常はP-TEFbを阻害することで転写伸長抑制を引き起こす2013

    • Author(s)
      古賀光徳、甲斐田大輔
    • Organizer
      日本RNA学会年会
    • Place of Presentation
      愛媛県県民文化会館
    • Year and Date
      20130724-20130726

URL: 

Published: 2015-05-28  

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