2014 Fiscal Year Research-status Report
界面科学及び免疫化学的手法を基軸とした天然由来両親媒性物質の細胞膜上分子挙動解析
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25750167
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
坂元 政一 九州大学, 薬学研究科(研究院), 助教 (50610177)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | ステアリルグリチルリチン / ステアリルグリチルレチン酸 / モノクローナル抗体 / ELISA |
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| Outline of Annual Research Achievements |
脂質ラフトは、刺激に応じて離散・分散を繰り返すダイナミックな構造体として捉えられており、その形成には構造脂質の分子構造的特性が深く関与する。そこで、まずステアリル基を修飾した不溶性GC,GAの合成を行い、それらを用いてLangmuir単分子膜手法を用いて脂質ラフトモデルとステアリル-GC(SGC), -GA(SGA)の界面化学的相互作用を分子レベルで明確にする。これにより、分子設計による新規DDSの開発や消化管吸収の改善へと繋がる研究に応用・展開することを目的としている。
平成25年度までに、SGC及びSGAの高純度精製を終了している。そのため、平成26年度はまず、SGAと脂質ラフトモデルとの相互作用を検討した。まず、Langmuir単分子膜手法を用いて二成分SGA/PSM, SGA/DOPC, SGA/CHOL系の界面物性を熱力学的及び形態学的側面から体系的に解析した。その結果、以下のことが明確となった。二成分SGA/PSM, SGA/DOPC, SGA/CHOL系は1)混和している2)特に0.7<XSGA<1の高モル分率では異種間の相互作用が大きい。3)SGA/PSM, SGA/DOPC系では、SGAの添加によってLC化が促進される。
また、抗GCモノクローナル抗体(MAb 5B4)を用いてSGA, SGCとの交差反応性試験を行った結果、MAb5B4はSGC,SGA共に交差反応を持たないことが判明した。そのため、新しいハプテンを用いた新たなMAbの作製を行う必要があることが示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本年度の研究計画では、SGC及びSGAの界面化学的解析を行うこととなっていた。SGAと脂質ラフトモデルとの界面化学的解析に関しては、Langmuir単分子膜手法のπ-A, V-A測定、BAM観察、FM観察、AFMを用いて系統的に解析を行い完結したが、その解析に時間を要し、SGCの界面化学的解析を行うに至らなかった。最終年度は、SGCと脂質ラフトモデルとの相互作用の解析及び新たなモノクローナル抗体(MAb)の作製を行う。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後の推進方法としては、まず、SGCを用いて脂質ラフトモデルの構成成分PSM, DOPC, CHOLを用いてそれぞれの界面化学的挙動を明らかにする。また、今年度、本研究を遂行する上で重要なツールとなるMAb 5B4がSGCとSGAとの交差反応性を持たないことが判明した。そのため、新たなハプテンを合成しSGC及びSGAを認識するMAbを作成する。
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| Causes of Carryover |
予定通り使用したと考えていた。
計算違いにより次年度へ20000円繰り越す結果となった。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
本研究のモノクローナル抗体を作製時に必要なeRDF培地の購入に当てる予定である。
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[Journal Article] Simultaneous determination of soy isoflavone glycosides, daidzin and genistin by monoclonal antibody-based highly sensitive indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay2015
Author(s)
Sakamoto, S., Yusakul, G., Pongkitwitoon, B., Paudel, M.K., Tanaka, H.*, Morimoto, S.
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Journal Title
Food Chemistry
Volume: 169
Pages: 127-133
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Production and characterization of highly-specific monoclonal antibodies to D-glutamic aci2014
Author(s)
Sakamoto, S., Matsuura, Y., Yonenaga, Y., Tsuneura, Y., Aso, M., Kurose, H., Tanaka, H.*, Morimoto, S.
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Journal Title
Monoclonal Antibodies in Immunodiagnosis and Immunotherapy
Volume: 33
Pages: 414-419
DOI
Peer Reviewed
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