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2013 Fiscal Year Research-status Report

アブシジン酸応答を負に制御する新規リン酸化タンパク質SNS1の機能解析

Research Project

Project/Area Number 25840103
Research Category

Grant-in-Aid for Young Scientists (B)

Research InstitutionTokyo University of Agriculture and Technology

Principal Investigator

梅澤 泰史  東京農工大学, (連合)農学研究科(研究院), 准教授 (70342756)

Project Period (FY) 2013-04-01 – 2015-03-31
Keywordsアブシシン酸 / シロイヌナズナ / リン酸化 / SnRK2 / プロテオーム
Research Abstract

アブシシン酸(ABA)は植物の環境応答の要となる植物ホルモンであり、そののシグナル伝達系ではSnRK2プロテインキナーゼが中心的な役割を果たしている。SnRK2によるシグナル伝達をさらに解析するために、リン酸化プロテオーム解析によるSnRK2の基質探索を行ったところ、複数の基質候補を得ることに成功した。SnRK2-substrate 1(SNS1)は、それらの候補の一つであり、植物体中でSnRK2プロテインキナーゼによってリン酸化されるタンパク質として同定された。その後の逆遺伝学的な解析によって、SNS1はABAシグナルを負に制御することがわかっている。
本研究課題では、SNS1が関与するABAシグナル伝達機構を明らかにすることを目的として、SNS1の機能解析を進めた。まず、SNS1欠損変異体(sns1-1)の表現型を詳細に調べたところ、SNS1は発芽時だけではなく、植物体においてもABAシグナル伝達に関わっていることが明らかとなった。たとえば、sns1-1では有意な乾燥ストレス耐性の増加が見られたり、開花期が遅延する現象が認められた。
一方、SNS1の分子機能の解析については、相互作用タンパク質の解析を軸に準備を進めているところであり、酵母ツーハイブリッド法や共免疫沈降法などを用いてSNS1と相互作用するタンパク質を同定する予定である。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

SNS1の遺伝子破壊株の表現型を調査し、野生型に比べて乾燥耐性が増加していることや、開花が遅れる等の表現型を新たに見出した。したがって、SNS1は植物体の様々な組織でABAシグナル伝達因子として機能していることが示された。また、SNS1の相互作用因子をスクリーニングするため、酵母ツーハイブリッド法や共免疫沈降法を行うためのDNAコンストラクトや形質転換植物を作成した。以上のことから、研究はおおむね順調に推移していると判断する。

Strategy for Future Research Activity

今後は、準備を進めている酵母ツーハイブリッド法や共免疫沈降法によってSNS1の相互作用因子の同定を進める予定である。相互作用因子の同定によって、SNS1によるシグナル伝達の実態が明らかになるとともに、SNS1のリン酸化の有無によるシグナル伝達の変化等も解析可能になることが期待される。

Expenditure Plans for the Next FY Research Funding

SNS1の相互作用因子をスクリーニングするための実験材料の準備に時間を要したため、当該年度中の実験が困難となったため、次年度に実験を繰り越した。そのため、表記の次年度使用額が発生した。
当初計画通りに、SNS1の相互作用因子スクリーニング実験に使用する予定である。

  • Research Products

    (10 results)

All 2014 2013

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results) Presentation (8 results) (of which Invited: 4 results) Book (1 results)

  • [Journal Article] Genetics and phosphoproteomics reveal a protein phosphorylation network in the abscisic acid pathway in Arabidopsis thaliana.2013

    • Author(s)
      Umezawa, T., Sugiyama, N., Takahashi, F., Anderson, J.C., Ishihama, Y., Peck, S.C. and Shinozaki, K.
    • Journal Title

      Science Signaling

      Volume: 6 Pages: rs8

    • DOI

      10.1126/scisignal.2003509

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] シロイヌナズナABA応答性転写因子AREB1のSer45はSnRK2のリン酸化標的部位である2014

    • Author(s)
      寺尾亮佑・篠崎一雄・梅澤泰史
    • Organizer
      第55回日本植物生理学会年会
    • Place of Presentation
      富山大学
    • Year and Date
      20140318-20140321
  • [Presentation] SnRK2-substrate 1はABAシグナル伝達を負に制御する2014

    • Author(s)
      石塚梢・鈴木梨沙・古崎俊則・石井一夫・篠崎一雄・梅澤泰史
    • Organizer
      第55回日本植物生理学会年会
    • Place of Presentation
      富山大学
    • Year and Date
      20140318-20140321
  • [Presentation] ヒメツリガネゴケにおけるABAシグナル伝達経路のリン酸化プロテオーム解析2014

    • Author(s)
      本多慶匡・杉山直幸・桑村真由里・寺尾亮佑・石塚梢・坂田洋一・竹澤大輔・篠崎一雄・石濱泰・梅澤泰史
    • Organizer
      第55回日本植物生理学会年会
    • Place of Presentation
      富山大学
    • Year and Date
      20140318-20140321
  • [Presentation] Phosphoproteomic Approaches Toward Understanding the ABA Signaling Network in Land Plants2013

    • Author(s)
      Umezawa, T.
    • Organizer
      Indo-Japan Joint Workshop on "Signal sensing and transduction in photosynthetic organisms - from cyanobacteria to land plants"
    • Place of Presentation
      ハイデラバード大学(インド)
    • Year and Date
      20131217-20131219
    • Invited
  • [Presentation] Integrating Genetics and Phosphoproteomics Reveals a Protein Phosphorylation Network in the Abscisic Acid Signaling Pathway in Arabidopsis.2013

    • Author(s)
      Umezawa, T., Sugiyama, N., Takahashi, F., Anderson, J.C., Ishihama, Y., Peck, S.C. and Shinozaki, K.
    • Organizer
      HUPO 12th Annual World Congress
    • Place of Presentation
      パシフィコ横浜
    • Year and Date
      20130914-20130918
  • [Presentation] 遺伝学とリン酸化プロテオミクスの融合によるアブシシン酸シグナル伝達系の包括的な解析2013

    • Author(s)
      梅澤泰史・杉山直幸・高橋史憲・Jeffery Anderson・坂田洋一・竹澤大輔・石濱泰・Scott Peck・篠崎一雄
    • Organizer
      第86日本生化学会大会
    • Place of Presentation
      パシフィコ横浜
    • Year and Date
      20130911-20130913
    • Invited
  • [Presentation] Phosphoproteomic Approaches to Understanding ABA Signaling Networks in Plants.2013

    • Author(s)
      Umezawa, T.
    • Organizer
      Gordon Research Conference - ‘Posttranslational Modification Networks: Phosphosignaling”
    • Place of Presentation
      香港科技大学(香港)
    • Year and Date
      20130728-20130731
    • Invited
  • [Presentation] Integrating Genetics and Phophoproteomics Reveals a Protein Phosphorylation Network in the Abscisic Acid Signaling Pathway in Arabidopsis.2013

    • Author(s)
      Umezawa, T., Sugiyama, N., Takahashi, F., Anderson, J. C., Terao, R., Ishizuka, K., Ishihama, Y., Peck, S. C. and Shinozaki, K.
    • Organizer
      24th International Conference of Arabidopsis Research 2013
    • Place of Presentation
      シドニーコンベンションセンター(オーストラリア)
    • Year and Date
      20130626-20130628
    • Invited
  • [Book] “Protein Phosphorylation Network” in Plant and Microbe Adaptations to Cold in a Changing World2013

    • Author(s)
      Umezawa, T., Sugiyama, N., Anderson, J. C., Takahashi, F., Ishihama, Y., Peck, S. C. and Shinozaki, K.
    • Total Pages
      352(pp.155ー164)
    • Publisher
      Springer

URL: 

Published: 2015-05-28  

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