2014 Fiscal Year Annual Research Report
マウスES細胞の分化誘導および体細胞からの直接誘導によるin vitro卵胞形成
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25860222
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
今村 公紀 京都大学, 霊長類研究所, 助教 (80567743)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | iPS細胞 / 生殖細胞 / 分化誘導 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
平成25年度の成果により、Oct4-GFP/Vasa-RFPダブルレポーターiPS細胞にNoboxとFiglaを強制発現させることによって、Vasa-RFP陽性細胞の出現が誘導されることが判明していた。そこで、Vasa-RFP陽性細胞に誘導効率の定量を実施した。Noboxの単独強制発現iPS細胞3株とNobox/Figlaの共発現iPS細胞5株について、Oct4-GFP陽性細胞コロニーに対するVasa-RFP陽性細胞コロニーの割合を計測したところ、遺伝子導入を行っていないiPS細胞では2.2％にあるのに対し、Nobox単独強制発現iPS細胞では12.1%、62.6%、13.6%、Nobox/Figla共発現iPS細胞では65.8%、52.4%、60.8%、34.9%、41.2%であった。このことから、Noboxの単独強制発現でもVasa-RFP陽性細胞の誘導効果はあるものの、Figlaとの共発現によって効果が増強されることが示唆された。次に、NoboxおよびNobox/Figlaの強制発現iPS細胞の分化誘導条件下での培養と遺伝子発現解析を行った。具体的には、胚様体形成培養やフィーダー細胞/LIF非存在下での接着を実施したところ、未分化条件下では観察されていたVasa-RFP陽性細胞が逆に消失し、体細胞系譜への分化が観察された。また、減数分裂マーカー遺伝子等の発現上昇も認められなかった。従って、NoboxおよびNobox/Figlaの強制発現iPS細胞ではVasa-RFP陽性細胞の出現頻度が上昇するものの、生殖細胞系譜へと完全には運命決定されていない準安定状態にあり、分化条件下では体細胞へと分化すると考えられた。
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[Journal Article] Gene expression ontogeny of spermatogenesis in the marmoset uncovers primate characteristics during testicular development2015
Author(s)
Zachary Yu-Ching Lin, Takamasa Hirano, Shinsuke Shibata, Naomi M. Seki, Ryunosuke Kitajima, Ayako Sedohara, Mikiko C. Siomi, Erika Sasaki, Haruhiko Siomi, Masanori Imamura, Hideyuki Okano
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Journal Title
Developmental Biology
Volume: 400
Pages: 43-58
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Small RNA profiling and characterization of piRNA clusters in the adult testes of the common marmoset, a model primate2014
Author(s)
Takamasa Hirano, Yuka W. Iwasaki, Zachary Yu-Ching Lin, Masanori Imamura, Naomi M. Seki, Erika Sasaki, Kuniaki Saito, Hideyuki Okano, Mikiko C. Siomi, Haruhiko Siomi
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Journal Title
RNA
Volume: 20
Pages: 1223-1237
DOI
Peer Reviewed
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[Presentation] Developmental dynamics and Culture of Testicular Germ Cells in Common Marmoset Callithrix Jacchus2014
Author(s)
Zachary YC Lin, Masanori Imamura, Takamasa Hirano, Eiji Matsunaga, Miki Taoka, Hiroo Imai, Hirotaka J. Okano, Atsushi Iriki, Mikiko C. Siomi, Haruhiko Siomi, Erika Sasaki, Hirohisa Hirai, Hideyuki Okano
Organizer
Cryopreservation Conference 2014
Place of Presentation
岡崎コンファレンスセンター
Year and Date
2014-10-23 – 2014-10-24
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