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2014 Fiscal Year Annual Research Report

ボツリヌス神経毒素結合タンパク質NTNHAの細胞層透過メカニズム

Research Project

Project/Area Number 25860325
Research InstitutionTokyo University of Agriculture

Principal Investigator

相根 義昌  東京農業大学, 生物産業学部, 教授 (00624660)

Project Period (FY) 2013-04-01 – 2015-03-31
Keywordsボツリヌス食中毒 / タンパク質毒素 / 消化管輸送
Outline of Annual Research Achievements

申請書に示した各研究計画項目別にその実績を以下に述べる。
1)NTNHAが細胞に結合し、透過するためには、NTNHA分子内のどのドメインが関与するのか:昨年度作成したNTNHA部分領域の組換え体タンパク質を用いて細胞への結合量を調べた結果、NTNHAのC末端側のみの組換えタンパク質が細胞への結合が大きく低下したことから、N末端側領域が細胞への結合にかかわっている可能性が示された。
2)NTNHAは、どの細胞に結合し、透過するのか:昨年度、一応の結果が得られたので、本年度は実施していない。
3)NTNHAは、細胞膜上の何を目印に細胞へ結合するのか:NTNHAタンパク質と抗NTNHA抗体を用いたプルダウン解析によって、NTNHAと結合するいくつかの細胞膜上のタンパク質を分離することに成功した。しかし、それらのタンパク質の同定には至らなかった。
4)NTNHAは細胞内のどこを通って、細胞層を透過するのか:細胞中に取り込まれたNTNHAを観察したところ、その大部分がアクチン分子と共存していた。このことから、NTNHAの細胞内輸送はアクチンに依存している可能性が示された。

  • Research Products

    (7 results)

All 2015 2014

All Journal Article (4 results) (of which Peer Reviewed: 4 results,  Acknowledgement Compliant: 1 results) Presentation (3 results)

  • [Journal Article] Purification, crystallization and preliminary X-ray analysis of an HA17–HA70 (HA2–HA3) complex from Clostridium botulinumtype C progenitor toxin2014

    • Author(s)
      Chikako Iwasa, Takashi Tonozuka, Masaya Shinoda, Yoshimasa Sagane, Koichi Niwa, Toshihiro Watanabe, Hiromi Yoshida, Shigehiro Kamitori, Toshifumi Takao, Keiji Oguma, and Atsushi Nishikawa
    • Journal Title

      Acta Crystallography F Structural Biology Communication

      Volume: 70 Pages: 64-67

    • DOI

      10.1107/S2053230X13032378

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Crystallization and preliminary X-ray analysis of a novel haemagglutinin component of the toxin complex of serotype C Clostridium botulinum.2014

    • Author(s)
      Shintaro Hayashi, Tomonori Akiyama, Yoshimasa Sagane, Shin-Ichiro Miyashita, Toshihiro Watanabe, Shunsuke Yajima, and Koichi Niwa
    • Journal Title

      Acta Crystallography F Structural Biology Communication

      Volume: 70 Pages: 370-373

    • DOI

      10.1107/S2053230X14003094

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Identification of the interaction region between hemagglutinin components of the botulinum toxin complex2014

    • Author(s)
      Tomonori Suzuki, Shin-Ichiro Miyashita, Shintaro Hayashi, Keita Miyata, Ken Inui, Yosuke Kondo, Satoru Miyazaki, Tohru Ohyama, Koichi Niwa, Toshihiro Watanabe, and Yoshimasa Sagane
    • Journal Title

      International Journal of Biological Macromolecules

      Volume: 65 Pages: 284-288

    • DOI

      10.1016/j.ijbiomac.2014.01.052

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Host-cell specificity and transcytosis of nontoxic nonhemagglutinin protein of botulinum neurotoxin serotype D2014

    • Author(s)
      Shin-Ichiro Miyashita, Koichi Niwa, Toshihiro Watanabe, and Yoshimasa Sagane
    • Journal Title

      FEMS Microbiology Letter

      Volume: 357 Pages: 115-122

    • DOI

      10.1111/1574-6968.12527

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Presentation] ボツリヌスC 型菌Yoichi 株の産生するHA-33/HA-17 複合体の構造解析2015

    • Author(s)
      林 慎太郎,相根 義昌,松本 崇,秋山 友了,宮下 慎一郎, 武藤 信吾,山野 昭人,矢嶋 俊介,渡部 俊弘,丹羽 光一
    • Organizer
      第88回日本細菌学会総会
    • Place of Presentation
      岐阜
    • Year and Date
      2015-03-26 – 2015-03-28
  • [Presentation] ボツリヌスC型菌Yoichi株が産生するHA-33の構造解析2014

    • Author(s)
      林 慎太郎, 相根 義昌, 松本 崇, 秋山 友了, 宮下 慎一郎, 長谷川 仁子, 山野 昭人, 矢嶋 俊介, 渡部 俊弘, 丹羽 光一
    • Organizer
      第87回日本生化学会大会
    • Place of Presentation
      京都
    • Year and Date
      2014-10-15 – 2014-10-18
  • [Presentation] D型ボツリヌス神経毒素結合タンパク質 非毒非血球凝集素の細胞種特異的なトランスサイトーシス2014

    • Author(s)
      宮下 慎一郎, 林 慎太郎, 丹羽 光一, 渡部 俊弘, 相根 義昌
    • Organizer
      第87回日本生化学会大会
    • Place of Presentation
      京都
    • Year and Date
      2014-10-15 – 2014-10-18

URL: 

Published: 2016-06-01  

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