2015 Fiscal Year Annual Research Report
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25860399
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| Research Institution | Meiji Pharmaceutical University |
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Principal Investigator |
月村 考宏 明治薬科大学, 薬学部, 助教 (50632783)
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2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 酵素製剤 / 基質類似体 / リソソーム病 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ファブリー病は、α-ガラクトシダーゼA（GLA）の活性低下により、基質である糖脂質が蓄積する遺伝病である。我々は、ファブリー病の新規酵素補充療法薬の候補として、α-N-アセチルガラクトサミニダーゼ（NAGA）の基質認識部位のアミノ酸を置換し、GLA活性を有するようにした改変型NAGAの開発を行っている。本研究では、改変型NAGAと同時投与することで改変型NAGAを安定化し、その治療効果を増大させる化合物を同定し、その効果を解析することとした。そして、昨年度までに、改変型NAGAに対して阻害作用を示す化合物のうち、細胞に改変型NAGAと同時添加することで、改変型NAGA単独添加に比べ、その細胞内取り込み量が約1.5倍増加する化合物を選出している。
本年度は、選出した化合物と改変型NAGAをモデルマウスに単回同時投与し、経時的（1時間後～5日後）に血中及び臓器中（肝臓、腎臓、心臓）の改変型NAGAの酵素活性を測定することで、血中及び臓器中で改変型NAGAが化合物により安定化されているか評価した。その結果、改変型NAGA単独投与と、化合物と改変型NAGAの同時投与の2群間で優位な差は確認されなかった。このことから、選出した化合物による改変型NAGAの安定化効果は、本投与条件では無いと考えられた。
このことから、本年度は、選出した化合物をポジティブコントロールとして用いることで、今後新規候補化合物を探索する際に役立つ新規スクリーニング法として、サーマルシフトアッセイ法を用いてTm値を測定する系を構築した。本方法は、多検体を同時に測定できるとともに、従来選出することが難しかった阻害作用を示さないが改変型NAGAを安定化する化合物を選出することを可能とするため、1次スクリーニング法として有用となる可能性がある。また本方法は、他の酵素製剤を安定化する化合物のスクリーニングにも応用可能である。
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Research Products
(17 results)
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[Journal Article] Rapid immunochromatographic detection of serum anti-α-Galactosidase A antibodies in Fabry patients after enzyme replacement therapy2015
Author(s)
Nakano S., Tsukimura T., Togawa T., Ohashi T., Kobayashi M., Takayama K., Kobayashi Y., Abiko H., Satou M., Nakahata T., Warnock D.G., Sakuraba H., Shibasaki F.
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Journal Title
PLoS One
Volume: 10
Pages: e0128351
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] A heterozygous female with Fabry disease due to a novel alpha-galactosidase A mutation exhibits a unique synaptopodin distribution in vacuolated podocytes2015
Author(s)
Takahashi N., Yokoi S., Kasuno K., Kogami A., Tsukimura T., Togawa T., Saito S., Ohno K., Hara M., Kurosawa H., Hirayama Y., Kurose T., Yokoyama Y., Mikami D., Kimura H., Naiki H., Sakuraba H., Iwano M.
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Journal Title
Clin. Nephrol.
Volume: 83
Pages: 301-308
DOI
Peer Reviewed
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