小児重症インフルエンザ（肺炎・脳症）におけるレドックス制御蛋白の役割の解明

2014 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 25860865
• Research Institution: Okayama University
• Principal Investigator: 八代 将登 岡山大学, 大学病院, 助教 (80585943)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2016-03-31
• Keywords: 小児感染症学 / インフルエンザ / 酸化ストレス

Outline of Annual Research Achievements

１，インフルエンザ肺炎モデルマウスの各臓器別TRX mRNA、TBP-2 mRNAの発現量と病理学的所見を比較した 。(1)C57/BL6マウスにA/PR/8/34株(1000PFU)の経鼻接種を行い、感染前および感染後1・3・5日後にマウスを解剖し、脳・肺・肝臓・腎臓・脾臓を採取し病理学的評価を行った。肺では、感染3日目以降に気管支周囲に炎症細胞浸潤を認めた。(2)各臓器中のTRX mRNA・TBP-2 mRNA発現量の変化を検討した。感染前ではTRX,TBP2共に肺での発現が最も多く、脳での発現量は低値であった。TRXとTBP2は肺と脾臓では感染3日目では発現が増加した。脳と肝臓では感染後に発現が低下した。腎臓ではTRXは感染後に発現が増加したが、TBP2は発現が低下した。TRXとTBP2は脳・肺・脾臓・肝臓での感染後の発現に相関を示したが、腎臓では逆相関を示した。
２，代謝異常型インフルエンザ脳症(Reye症候群様)モデルマウスを確立し、野生型マウスと比較した。(1)TBP2KOマウスに１と同様にインフルエンザ感染を行い、野生型マウスとの生存率・臨床症状を比較した。生存率に有意差は認めなかった。野生型マウスは肺炎を来たし死亡したのに対し、TBP2KOマウスでは肺炎像が軽微であった。TBP2KOマウスでは著明な脂肪肝を認めた。(2)感染後のマウス血清中のサイトカインを測定した。野生型では感染3日目にTNFαとCXCL1の上昇を認めたが、TBP2KOマウスでは上昇を認めなかった。
３，インフルエンザ脳炎モデルマウスを確立し、全身（血液）と局所（髄液）のサイトカインを比較した。(1)野生型マウスにインフルエンザを脳内に直接感染させ、生存率・臨床症状を確認した。(2)血液ではG-CSF,IFNγ,IL-12, MCP-1,IP-10,TNFαが上昇し、髄液ではIL-10,IL-13が上昇した。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

実験を繰り返し、安定した髄液採取を行えるようになった。まず野生型マウスを用いて、インフルエンザ脳炎モデルマウスを作成し、血液と髄液の評価を行った。現在動物実験施設が改装中であり使用できないため、実験はやや遅延している。

Strategy for Future Research Activity

TBP2KOマウスの死因を解明するため、血清・髄液・脳組織を採取し、血清・髄液中のサイトカイン・ケモカイン測定および脳組織の病理学的評価を行う予定である。さらに静注したエバンスブルー色素の脳内への漏出の程度から血液脳関門機能評価を行う。

Causes of Carryover

実験に用いた試薬が予定より安く購入できたため、かつ、商品・機器の納期が遅れたため未使用額が生じた。

Expenditure Plan for Carryover Budget

計画通りに実験を推進する.