重粒子線照射後におけるヒト癌細胞の遊走、浸潤、転移能についての研究

2014 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 25861071
• Research Institution: Gunma University
• Principal Investigator: 村田 和俊 群馬大学, 重粒子線医学推進機構, 助教 (60644557)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2016-03-31
• Keywords: ヒト肺線癌細胞 / 炭素線照射 / 遊走能 / Rho / ROCK

Outline of Annual Research Achievements

遊走能の放射線照射による影響とROCKとの関連について、その特異的阻害薬であるY27632を併用し、インビトロ環境で探索した。最初に炭素戦傷者による細胞増殖能への影響を確認するため、WST-1アッセイを行った。この実験ではA549が炭素線照射後から72時間以降において、非照射群に比較して有意に増殖能が低下した。そのため、増殖能による影響を最小にするため、遊走能に関する実験は炭素線照射から48時間以内の現象について検討した。次に炭素戦傷者による遊走距離の変化を観察するためにwound-healing-assayを行った。炭素線を照射した細胞群では非照射の細胞群と比較して、照射後48時間の遊走距離が有意に長く、さらに高線量を照射した細胞群では遊走距離が長くなっており、炭素線が遊走能を増強することが示唆された。また、細胞骨格への影響を観察するため、Fアクチン染色を思考すると、炭素線被照射群と比較して炭素線を照射した細胞群では細胞郵送時に見られる細胞骨格変化の一つである突起形成の出現率が有意に高く、この結果から細胞形態学的にも炭素線照射が遊走能を更新させることが示唆された。
上記内容をJournal of Radiation Researchに論文発表し採択された。
現在In Vitroにおける浸潤能を確認する実験を施行中

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

昨年はインビトロの遊走能の研究で論文化することができたが、その後migratio-nassay、invasion-assayの結果が、安定せず当初のIn Vivoの段階まで進めていない。

Strategy for Future Research Activity

migrationassay、invasionassayの結果を検討し、条件を更に詰めていく。
また同時にIn Vivoの研究準備を急ぐ

Causes of Carryover

昨年度施行予定だった、In Vivo実験を施行することができなかったため。

Expenditure Plan for Carryover Budget

In Vivo実験に使用するマウスの購入費用

Research Products

• [Journal Article] Increase in cell motility by carbon ion irradiation via the Rho signaling pathway and its inhibition by the ROCK inhibitor Y-27632 in lung adenocarcinoma A549 cells (2014)
  • Author(s): Kazutoshi MURATA, Shin-ei NODA, Takahiro OIKE, Akihisa TAKAHASHI, Yukari YOSHIDA, Yoshiyuki SUZUKI, Tatsuya OHNO, Tomoo FUNAYAMA, Yasuhiko KOBAYASHI, Takeo TAKAHASHI, Takashi NAKANO
  • Journal Title: Journal of Radiation Research Volume: 55(4) Pages: 658-64
  • DOI: 10.1093/jrr/rru002
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant