2014 Fiscal Year Annual Research Report
悪性中皮腫における癌幹細胞CD44アイソフォームの解析と下流シグナル経路の解明
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25861244
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
川口 晃司 名古屋大学, 医学部附属病院, 病院講師 (10402611)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 悪性胸膜中皮腫 / CD44 / バリアントアイソフォーム / ヒアルロン酸 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
我々は癌幹細胞表面マーカーである接着分子CD44に着目し、悪性胸膜中皮腫におけるバリアントアイソフォームの解析をするとともに、中皮腫細胞においてヒアルロン酸に結合するLinkファミリー蛋白としての機能について分子レベルで解明をすすめてきた。
これまでに悪性胸膜中皮腫の検体を集め、主に胸水から細胞株樹立に着手してきた。日本人由来の中皮腫細胞株を含む約20株を用いてCD44の発現をWestern blot法やFACS (fluorescence activated cell sorting) 法を用いて確認した。
その結果、ほとんどすべての中皮腫細胞株でCD44が高発現しており、さらにバリアントを含め比較的均一でhomogeneousな細胞集団を形成している細胞株から、発現レベルも様々なheterogeneousな細胞株まで様々であった。バリアントアイソフォームに関しては、PCRを主体に解析を進め、細胞株によって異なったバリアントアイソフォームを確認した。CD44はアイソフォームの数が多く、細胞株によってその発現が多岐に及ぶと解析が困難にはなるため、現状の細胞株数では一定の見解を得難く、さらなる細胞株の樹立が必要と考え樹立を試みてきた。
またヒアルロン酸の分泌過剰の一因としてHAS2の発現が上昇しており、さらにその受容体であるCD44の発現も上昇していることを明らかにした。HAS2・CD44のKnockdownでは有意な差を認めなかったことから、治療標的としては課題の残る結果であったが、FACS法によりこれらの細胞株のCD44の発現は非常にHeterogeneityが強いことも確認した。
今後の検討方針として、フローサイトメトリーを用いCD44の発現の高い細胞をソーティングすることで、治療標的としての効果判定を追加検討するほか、下流のシグナル経路についてもexpression array・LC/MSを用いて、mRNA・プロテインレベルでの統合解析を予定している。
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[Journal Article] Micronodular Thymoma with Lymphoid Stroma: An Immunohistochemical Study of the Distribution of Langerhans Cells and Mature Dendritic Cells in Six Patients.2015
Author(s)
Ishikawa Y, Tateyama H, Yoshida M, Takami K, Matsuguma H, Taniguchi T, Usami N, Kawaguchi K, Fukui T, Ishiguro F, Nakamura S, Yokoi K.
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Journal Title
Histopathology
Volume: 66
Pages: 300-7
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Trimodality Therapy for Lung Cancer With Chest Wall Invasion: Initial Results of a Phase II Study.2014
Author(s)
Kawaguchi K, Yokoi K, Niwa H, Ohde Y, Mori S, Okumura S, Shiono S, Ito H, Yano M, Shigemitsu K, Hiramatsu Y, Okami J, Saito H
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Journal Title
Ann Thorac Surg.
Volume: 98
Pages: 1184-91
DOI
Peer Reviewed
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