グリオーマの悪性転化に関わる新規バイオマーカーの機能解明

2013 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 25861268
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• Research Institution: Nagoya University
• Principal Investigator: 本村 和也 名古屋大学, 医学部附属病院, 助教 (30467295)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2015-03-31
• Keywords: グリオーマ / 悪性転化 / DMBT1 / MET

Research Abstract

我々は、一次性及び二次性膠芽腫に共通して高頻度に見られる第10番染色体長腕欠失及び、第7番染色体長腕増幅という遺伝子異常に着目し、ある共通の遺伝子異常が低悪性度グリオーマから二次性膠芽腫への悪性転化の原因になっているのではないかと考えている。以前、低悪性度グリオーマにおける網羅的遺伝子解析により、DMBT1などの新規がん抑制遺伝子およびMETなどの新規がん遺伝子を見出した。DMBT1欠失及びMET増幅のあるグリオーマ幹細胞株に、DMBT1及びMET-shRNAを遺伝子導入し、様々な機能解析をすることで、悪性グリオーマの腫瘍増殖・進展及び悪性転化に関わるメカニズムを解明することを目的として研究を進めている。
本年度は、DMBT1及びMET-shRNAを発現するベクターを作成し、遺伝子組み込みを主に行ってきた。まず本年度前半は、DMBT1の遺伝子導入及びMET遺伝子をノックダウンするために、高効率遺伝子導入用レトロウイルスベクターであるpDON-AI-2 DNAを使用して、DMBT1及びMET-shRNAを発現するベクター作成を行ってきた。かなりの時間を要したがベクター作成に成功することができた。
次に、我々が持つ4種類のグリオーマ幹細胞株（Glioma-initiating cells; GICs）とグリオーマ細胞株(T98G, U251, U87)に遺伝子導入を試みているが、なかなか導入が困難であり時間を要している。特に、GICへの遺伝子導入が不安定であり、条件を変えながら行っているが未だ作成できずに終わっている。現在は、GIC以外で、U87のグリオーマ細胞株を中心に安定発現細胞株の作成を目標としているが、試行錯誤している段階にある。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

DMBT1及びMET-shRNAを発現するベクター作成にかなりの時間を要したことと、4種類のグリオーマ幹細胞株とグリオーマ細胞株(T98G, U251, U87)に遺伝子導入を試みているが、なかなか導入が困難であり時間を要しているため。

Strategy for Future Research Activity

グリオーマ幹細胞株とグリオーマ細胞株(T98G, U251, U87)に遺伝子導入を成功させ、DMBT1遺伝子導入細胞株及びMET遺伝子のノックダウン細胞株の形態変化、腫瘍の増殖進展様式を詳細に観察することを目標としている。

Expenditure Plans for the Next FY Research Funding

購入予定していたベクターの購入数が少なくてすんだため、次年度使用額が生じた。
In vivo実験でのマウス購入にあてたいと考えている。

Research Products

• [Journal Article] Peptide-based inhibition of the HOXA9/PBX interaction retards the growth of human meningioma (2014)
  • Author(s): Ando H, Natsume A, Senga T, Watanabe R, Ito I, Ohno M, Iwami K, Ohka F, Motomura K, Kinjo S, Ito M, Saito K, Morgan R, Wakabayashi T
  • Journal Title: Cancer Chemother Pharmacol. Volume: 73(1) Pages: 53-60
  • DOI: 10.1007/s00280-013-2316-5.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Preclinical evaluation of an O6-methylguanine-DNA methyltransferase -siRNA/liposome complex administered by convection-enhanced delivery to rat and porcine brains (2014)
  • Author(s): Tsujiuchi T, Natsume A, Motomura K, Kondo G, Melissa Ranjit, Hachisu R, Sugimura I, Tomita S, Takehara I, Max Woolley, Neil Barua, Steven Gill, Alison Bienemann, Yamashita Y, Toyokuni S, Wakabayashi T
  • Journal Title: American Journal of Translational Research Volume: 6(2) Pages: 169-178
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Quantitative metabolome analysis profiles activation of glutaminolysis in glioma with IDH1 mutation. (2014)
  • Author(s): Ohka F, Ito M, Ranjit M, Senga T, Motomura A, Motomura K, Saito K, Kato K, Kato Y, Wakabayashi T, Soga T, Natsume A.
  • Journal Title: Tumour Biol Volume: - Pages: in press
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Association of dorsal inferior frontooccipital fasciculus fibers in the deep parietal lobe with both reading and writing processes: a brain mapping study. (2014)
  • Author(s): Motomura K, Fujii M, Maesawa S, Kuramitsu S, Natsume A, Wakabayashi T.
  • Journal Title: J Neurosurg. Volume: - Pages: in press
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] MET gain in diffuse astrocytomas is associated with poorer outcome. (2013)
  • Author(s): Pierscianek D, Kim YH, Motomura K, Mittelbronn M, Paulus W, Brokinkel B, Keyvani K, Wrede K, Nakazato Y,Tanaka Y,Mariani L, Vital A, Sure U, Ohgaki H.
  • Journal Title: Brain Pathology Volume: 23(1) Pages: 13-18
  • DOI: 10.1111/j.1750-3639.2012.00609.x.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] PDGFRA Gain in Low-Grade Diffuse Gliomas (2013)
  • Author(s): Motomura K, Mittelbronn M, Paulus W, Brokinkel B, Keyvani K, Sure U, Wrede K, Nakazato Y,Tanaka Y, Nonoguchi N, Pierscianek D, Kim YH, Mariani L, Vital A, Perry A, Ohgaki H
  • Journal Title: J Neuropathol Exp Neurol. Volume: 72(1) Pages: 61-66
  • DOI: 10.1097/NEN.0b013e31827c4b5b
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Lack of presence of the human cytomegalovirus in human glioblastoma (2013)
  • Author(s): Yamashita Y, Ito Y, Isomura H, Takemura N, Okamoto A, Motomura K, Tsujiuchi T, Natsume A, Wakabayashi T, Toyokuni S, Tsurumi T
  • Journal Title: Modern Pathology Volume: epub Pages: 1-8
  • DOI: 10.1038/modpathol.2013.219
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Intra-tumoral heterogeneity of PDGFRA / MET gain in WHO grade II diffuse astrocytomas (2013)
  • Author(s): Motomura K, Mittelbronn M, Paulus W, Brokinkel B, Keyvani K, Sure U, Wrede K, Nakazato Y,Tanaka Y, Nonoguchi N, Pierscianek D, Kim YH, Mariani L, Vital A, Perry A, Ohgaki H
  • Organizer: AACR Annual Meeting 2013
  • Place of Presentation: Washington, DC, USA
  • Year and Date: 20130406-20130410
• [Presentation] 脳腫瘍手術における術中運動神経モニタリング
  • Author(s): 本村和也
  • Organizer: 第3回奈良術中神経モニター講習会
  • Place of Presentation: AP大阪駅前梅田1丁目、大阪市
  • Invited
• [Presentation] WHO grade II diffuse astrocytomaに おけるPDGFRA / MET gainの腫瘍内不均一性
  • Author(s): 本村和也、夏目敦至、若林俊彦、Hiroko Ohgaki
  • Organizer: 第31回日本脳腫瘍病理学会
  • Place of Presentation: KFC Hall 国際ファッションセンター、東京都墨田区