2014 Fiscal Year Research-status Report
滑膜組織と滑膜由来間葉系幹細胞の至適保存条件の検討
| Project/Area Number |
25861299
|
|---|
| Research Institution | Tokyo Medical and Dental University |
|---|
Principal Investigator |
堀江 雅史 東京医科歯科大学, 再生医療研究センター, 助教 (90622647)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
|
| Keywords | 滑膜幹細胞 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
間葉系幹細胞は、成体のさまざまな間葉組織から採取可能であるが、滑膜由来の間葉系幹細胞（滑膜幹細胞）は、自己血清を用いた培養での増殖能が高く、軟骨分化能が高いことから、軟骨再生や半月板再生に対する有用な細胞源となる。当施設では軟骨損傷に対して自家滑膜幹細胞を軟骨欠損部に移植する新たな治療法を開発し、良好な成績を得ている。しかし、移植用細胞を分離・培養するための施設としての高い基準を有した細胞加工施設は国内でも限られており、多くの施設で我々の開発した治療法を普及させるためには、滑膜組織や分離した幹細胞を適切に保存し輸送することが必須となる。以上より、本研究課題では、手術後に採取された滑膜を各地の細胞加工施設に搬送するための保存・移送条件の最適化を試みた。人工膝関節置換術時に切除された滑膜組織を検体材料とした。本年度は、滑膜組織の保存条件を最適化するために、初年度に検証した条件を基盤として温度条件の検証を行った。各種溶液に浸漬した滑膜組織を4℃、25℃、37℃に24時間から14日間静置し、その組織を用いて細胞数およびコロニー形成能の評価を行った。さらに、最適な保存条件を抽出するための新たな検査系としてアポトーシスの指標であるcaspase-3の検出系を立ち上げた。昨年度に検討し確立した本検査により本年度の解析においても強力なツールとなることが期待される。現在、得られた成果を論文として作製準備をしている。さらに昨年度に研究代表者が所属する研究チームは、これまで培ってきた技術を臨床的に応用するため、滑膜幹細胞の総合的な細胞操作技術を特許化した(特許 第5656183号：滑膜由来間葉幹細胞（ＭＳＣｓ）の軟骨・半月板再生への応用)。今回の研究により得られた知見と特許化した技術を統合することにより、多くの患者への適応を前提とした再生医療の基盤技術を確立できるものと期待される。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
初年度に検証した条件を基盤として温度条件の検証を行った。各種溶液に浸漬した滑膜組織を4℃、25℃、37℃に24時間から14日間静置し、その組織を用いて細胞数およびコロニー形成能の評価を行った。さらに、最適な保存条件を抽出するための新たな検査系としてアポトーシスの指標であるcaspase-3の検出系を立ち上げた。
|
| Strategy for Future Research Activity |
最適な保存条件を抽出するための新たな検査系としてアポトーシスの指標であるcaspase-3の検出系を立ち上げた。引き続き組織保存、細胞保存の至適条件について検討する予定である。
|
| Causes of Carryover |
本年度は実験に必要な細胞培養のための物品等は実験室に既存のものを使用できたため。また実験に必要なサンプルそのものの入手は手術時の検体が得られたため。
|
| Expenditure Plan for Carryover Budget |
今後、実験解析のための物品を購入する必要がある。また実験の成果が得られたところで学会発表の予定もあり学会参加費・旅費等が必要になる。
|
