2013 Fiscal Year Research-status Report
iTRAQ法による網羅的膜蛋白質の解析を用いた子宮平滑筋肉腫の新しい治療法の樹立
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25861491
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Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
松崎 慎哉 大阪大学, 医学部附属病院, 助教 (00467565)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 婦人科腫瘍 |
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| Research Abstract |
① 網羅的蛋白質発現解析により同定された子宮平滑筋肉腫において特異的に発現している候補蛋白質の臨床検体および細胞株における発現膜蛋白質を解析するiTRAQ法による網羅的解析にて、子宮平滑筋肉腫に特異的に発現する蛋白質候補として、蛋白質Ａと蛋白質Ｂを同定した。このうち蛋白質Ａは、子宮平滑筋肉腫細胞株3株のうち、1株で発現を認めた。臨床検体における評価では18例の検体のうち、12例(66.7%)と発現を認めていた。
② 蛋白質Ａの発現の子宮肉腫における役割の検討
蛋白質Ａを発現する子宮平滑筋肉腫細胞SK-LMSにおいて、蛋白質Ａの発現をsiRNAを用いて抑制したところ、増殖速度が有意に減少した（p<0.05）。これらのことから、子宮平滑筋肉腫において特異的に発現する蛋白質Ａが、子宮平滑筋肉腫の増殖において重要であることが示唆された。
③ 蛋白質Ａが子宮平滑筋肉腫細胞において増殖にどの様に働いているか
子宮平滑筋肉腫細胞株であるSK-LMSに対してsiRNAを用い蛋白質Ａの発現を抑制した上で、アポトーシス関連蛋白であるCaspase3を評価したところ上昇を認めず、増殖の抑制はアポトーシスが誘導されたためでないことがわかった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
25年度計画はほぼ終了している。細胞接着・細胞間相互作用・細胞移動について評価を行っていないのは、蛋白質Ａの抑制が非常に効果的に増殖抑制を示しており、こちらの機序解明を優先させるべきと考えられたためである。
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| Strategy for Future Research Activity |
蛋白質Ａの子宮平滑筋肉腫の増殖に関わるメカニズムの解析
（１） 蛋白質ＡのSKNもしくはSK-UT1細胞株において強制発現による増殖の変化（２） 蛋白質Ａの強制発現による蛋白質の発現の変化（３）子宮平滑筋肉腫における蛋白質Ａの役割の検討（４）蛋白質Ａと増殖に関わるpathway解析（５） 蛋白質Ａに対する中和抗体の作成
蛋白質Ａの発現抑制による子宮平滑筋肉腫の増殖抑制は既に証明できたが、逆に、蛋白質Ａの強制発現による子宮平滑筋肉腫細胞の増殖の変化を検証する。またこれに伴うpathwayの変化等も解析する。
最後に、マウスを用いて、蛋白質Ａに対する中和抗体の作成を試みる。
中和抗体を作成できた場合、それを用いてマウスにおける子宮平滑筋肉腫細胞の増殖を抑制できるかを検討する。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
蛋白質Ａの子宮平滑筋肉腫の増殖に関わるメカニズムの解析、マウスを用いた蛋白質Ａに対する中和抗体の作成の為、物品購入を控えた。
蛋白質Ａの子宮平滑筋肉腫の増殖に関わるメカニズムの解析、マウスを用いた蛋白質Ａに対する中和抗体の作成の為、必要物品の購入を予定している。
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[Journal Article] Annexin A4-conferred platinum resistance is mediated by the copper transporter ATP7A2014
Author(s)
Matsuzaki, S. Enomoto, T. Serada, S. Yoshino, K. Nagamori, S. Morimoto, A. Yokoyama, T. Kim A. Kimura, T. Ueda, Y. Fujita, M. Fujimoto, M. Kanai, Y. Kimura, T. Naka, T.
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Journal Title
Int J Cancer
Volume: 134(8)
Pages: 1796-809
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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