頭頸部癌における新規治療ターゲット CIN85の機能解析

2014 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 25861567
• Research Institution: National Hospital Organization, Kyushu Cancer Center
• Principal Investigator: 若崎 高裕 独立行政法人国立病院機構(九州がんセンター臨床研究センター), その他部局等, その他 (10608871)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2016-03-31
• Keywords: 頭頸部癌 / EGFR / CIN85

Outline of Annual Research Achievements

Epidermal Growth Factor Receptor(EGFR)は頭頸部扁平上皮癌で高頻度に発現し、EGFR signalingが発癌、増殖、浸潤、転移といった 癌の進展に大きく関与することは臨床検体による研究および分子生物学的基礎研究により示されている。EGFRに対する分子標的薬（ce tsuximaｂなど）の治療効果は限定的である。その原因として、EGFRシグナル下流での恒常的シグナル伝達などが一因と考えられる。
今回の研究では、レセプターの内在化とシグナルの両方を統合しうるアダプター蛋白c-Cbl-Interacting Protein of 85 kDa (CIN85) に着目した。CIN85は様々な細胞に発現し、上流シグナルを統合し下流分子につなぎ機能発現をおこなう。CIN85の特徴的な機能のひと つのEGFRを含むreceptor tyrosine kinases(RTKs)のリガンド結合後の内在化を促進する機能により、内在化後のEGFR分解を促進する 腫瘍増勢に負に寄与する因子と考えられてきた。申請者は、CIN85発現量と臨床パラメーターの関係性の解析を行い、進行病期の頭頸 部癌組織ではCIN85が高発現していることを見いだし、ヒトの癌においてCIN85発現量と腫瘍進展に関係性がある初めての証拠を示した。頭頸部癌細胞株の実験において、CIN85はTGF-α刺激によるRas活性化およびその下流分子であるc-Raf,MEK,ERKの活性化を促進し、頭頸部癌の持続増殖に必須なc-Mycの発現量を増加、細胞増殖に正に相関することを示した。最近の報告では乳がんにおいてCIN85はPI3- Akt経路を通じて腫瘍浸潤能を高めたとの知見が得られた。頭頸部癌にいてもCIN85の高発現が腫瘍浸潤能を高めることを証明しており、分子生物学的機序の解析を進めている。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

平成２6年度6月に九州がんセンターに異動し、主な実験が移動先で行うこととなりました。したがって、実験の体制準備に時間を要しました。既に細胞実験は再開しており、解析を進めております。異動先において臨床検体に関する倫理委員会の承認を得た段階であり、病理科に協力を仰いでタンパク発現解析を進めつつあります。

Strategy for Future Research Activity

異動先での実験体制は整いつつある。九州大学施設の協力も仰ぎながら実験を行う。マイクロアレイに関しては外部の研究機関を積極的に利用する。

Causes of Carryover

交付していただいた金額の問題や申請者の実験時間の確保が十分に行えなかったことから、初年度に予定していたマイクロアレイ実験（網羅的遺伝子発現解析）は行っておらず、翌年度予算と合わせて行う方針としたために次年度使用額が生じました。

Expenditure Plan for Carryover Budget

網羅的遺伝子発現解析を行うが、外部委託とした。その後の確証実験にも試薬が必要と考える。具体的にはｍRNAレベルでの確認（quantitative RT-PCR）、蛋白レベルでの解析（免疫
染色、フローサイトメトリーなど）にも多くの試薬が必要となると思われる。各種インヒビター（MEK inhibitor, PI3K inhibitor, S rc inhibitor）やRNA干渉を用いて増殖系、浸潤系への影響を検討する実験を想定している。