2015 Fiscal Year Research-status Report
頭頸部癌癌幹細胞における血管内皮細胞増殖因子の微小環境としての働きに関する研究
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25861587
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| Research Institution | Keio University |
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Principal Investigator |
羽生 昇 慶應義塾大学, 医学部, 共同研究員 (60365369)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 癌 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
血管内皮細胞増殖因子の頭頸部癌癌幹細胞における微小環境・ニッチとしての役割の一端を明らかにすることである。
本年度は臨床検体として舌癌における原発巣の血管内皮細胞増殖因子VEGFおよび血管内皮細胞増殖因子受容体VEGFR、頭頸部扁平上皮癌癌幹細胞における癌幹細胞マーカーとしてOct3/4,Nanogの免疫組織化学染色を行った。舌癌の臨床検体ステージⅠ/Ⅱにおいては後発頸部リンパ節転移(DNM:delayed neck metastasis)と癌幹細胞マーカーOct3/4,Nanogの発現に正の相関関係がみられた。臨床病理学的因子としては後発頸部リンパ節転移と血管侵襲の間に、正の相関関係が見られた。進行癌を含めた舌癌では、血管内皮細胞増殖因子VEGFの発現と、頸部リンパ節転移に正の相関関係が見られた。血管侵襲部位周囲に血管内皮細胞増殖因子受容体VEGFRが認められる傾向があった。癌幹細胞マーカーOct3/4,Nanogの近傍に血管侵襲が認められることから微小環境・ニッチが近傍に位置する可能性があると考えられた。
頭頸部扁平上皮癌細胞株に、Hoechst3342を投与し、染色された細胞が約1%前後でありSP細胞であり、癌幹細胞を多く含んだ細胞と考えられた。SP細胞とnon-SP細胞にOct3/4,Nanog,ABCG2をRT-PCRで比較するとSP細胞はOct3/4,Nanog,ABCG2の発現が高いことが確認された。また頭頸部扁平上皮癌細胞株に血管内皮細胞増殖因子VEGFを刺激すると細胞増殖、細胞遊走能の亢進が認められることも確認した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
舌癌臨床検体において、血管内皮細胞増殖因子VEGFや癌幹細胞マーカーのOct3/4,Nanogの免疫組織化学染色は順調に進行し、症例数もふやせた。頭頸部癌細胞株において、血管内皮細胞増殖因子VEGF、血管内皮細胞増殖因子受容体VEGFRの発現ベースラインも確認した。またVEGF刺激による遊走能、増殖能の亢進なども確認した。頭頸部扁平上皮癌細胞株から抽出した癌幹細胞様細胞（SP細胞）へ血管内皮細胞増殖因子VEGFを投与する刺激実験が、SP細胞抽出が安定しなかったため、やや遅れた。
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| Strategy for Future Research Activity |
舌癌臨床検体における血管内皮細胞増殖因子VEGF、血管内皮細胞増殖因子受容体VEGFR、癌幹細胞マーカーOct3/4、Nanogの免疫組織化学染色の症例数はふえたので、あらたに統計学的解析を行い予後、転移などの臨床データとの相関関係の解析を進める。頭頸部扁平上皮癌細胞株の癌幹細胞SP細胞とnon-SP細胞に血管内皮細胞増殖因子VEGFを投与して遊走能、増殖能、細胞生存能力、自己複製能などを比較検討する予定である。舌癌臨床検体は、ステージⅠ/Ⅱ以外にも、進行癌での検体症例数がふえたので、臨床検体の実験結果と細胞株の実験結果をあわせて評価する予定である。
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| Causes of Carryover |
免疫組織科学染色に使用する際の抗体などを効率的に使用したため残額が生じた
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
舌癌臨床検体の症例数を増やした際の免疫組織化学染色および頭頸部扁平上皮癌細胞株の免疫細胞染色を行う際に、有効に用いる予定である。
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