2014 Fiscal Year Annual Research Report
日本人網膜色素変性患者におけるEYS遺伝子変異の迅速検査法の開発と臨床への応用
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25861626
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| Research Institution | Hamamatsu University School of Medicine |
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Principal Investigator |
細野 克博 浜松医科大学, 医学部, 助教 (60402260)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 網膜色素変性 / EYS遺伝子 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
網膜色素変性(RP)は、失明に至る進行性、遺伝性の疾患群で、眼科領域で最も重篤な疾患である。本疾患に対して有効な治療法が開発されるためには遺伝子レベルでの病因解明が必要である。申請者らは、我が国の常染色体劣性(ar)RP患者でEYSに変異が検出される頻度が非常に高いことを報告した(Hosono et al., PLoS ONE 2012)。
日本人arRP患者の遺伝子診断にはEYSの変異解析が重要である。しかし、EYSはエキソン数が多く翻訳領域も長いためゲノムDNAを用いた変異解析法は効率が悪い。申請者はEYSのmRNAが鼻腔粘細胞に発現していることを発見した。本研究は鼻粘膜から擦過した検体を用いて簡易で精密なEYSの変異解析法を開発し、日本人RP患者の遺伝子診断に応用するための基礎データを収集することが目的である。またEYSに変異が同定されている患者の中で片側アリルの変異のみしか同定されていない患者が複数例見つかっている。変異が片側アレルにしか同定されなかった症例の原因の１つとして、変異が見つかっていない片側アリルの一部エキソン領域に欠失や重複が存在している可能性がある。その場合、PCRダイレクトシーケンス法では検出できないためにMLPA解析を併用する必要がある。
本年度は、正常人の鼻腔粘膜細胞からRNAを抽出し、RT-PCR法を用いて鼻腔粘膜細胞に発現しているEYSの構造解析を行った。結果、鼻腔粘膜細胞由来cDNAからは、網膜で発現しているEYSのエキソン33の一部とエキソン34~44の転写物を確認した。また、片側アリルの変異のみしか原因変異を同定されていない9名の患者にEYSについてMLPA解析を行い、2名にコピー数異常が示唆された。EYSの変異解析にエキソンレベルのコピー数変異の検討は重要である。
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[Journal Article] The first USH2A mutation analysis of Japanese autosomal recessive retinitis pigmentosa patients: a totally different mutation profile with the lack of frequent mutations found in Caucasian patients.2014
Author(s)
Yang Zhao, Katsuhiro Hosono, Kimiko Suto, Chie Ishigami, Yuki Arai, Akiko Hikoya, Yasuhiko Hirami, Masafumi Ohtsubo, Shinji Ueno, Hiroko Terasaki, Miho Sato, Hiroshi Nakanishi, Shiori Endo, Kunihiro Mizuta, Hiroyuki Mineta, Mineo Kondo, Masayo Takahashi, Shinsei Minoshima, Yoshihiro Hotta.
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Journal Title
J Hum Genet.
Volume: 59
Pages: 521-528
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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[Presentation] The first USH2A mutation analysis of Japanese Autosomal Recessive Retinitis Pigmentosa patients: A totally different mutation profile with the lack of frequent mutations found in Caucasian patients2014
Author(s)
Katsuhiro Hosono, Yang Zhao, Kimiko Suto, Chie Ishigami, Yuuki Arai, Akiko Hikoya, Yasuhiko Hirami, Masafumi Ohtsubo, Shinji Ueno, Hiroko Terasaki, Miho Sato, Hiroshi Nakanishi, Shiori Endo, Kunihiro Mizuta, Hiroyuki Mineta, Mineo Kondo, Masayo Takahashi, Shinsei Minoshima, and Yoshihiro Hotta
Organizer
XVIth International Symposium on Retinal Degeneration
Place of Presentation
California
Year and Date
2014-07-13 – 2014-07-18
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