2014 Fiscal Year Research-status Report
羊膜上培養歯根膜由来細胞シートを用いた新たな骨再生医療に関する基礎的研究
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25861966
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| Research Institution | Kyoto Prefectural University of Medicine |
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Principal Investigator |
雨宮 傑 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (90398389)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 移植・再生医療 / 再生医学 / 細胞・組織 / 歯学 / 臨床 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
骨再生能を有した新規培養歯根膜由来細胞シートの開発を最終目標に、羊膜上にて歯根膜由来細胞の骨分化誘導培養を行った。同培養シートは骨芽細胞関連のタンパク発現を認め、新生骨形成能、すなわち歯周組織再生を促進する細胞を有していることを明らかにしてきた。現在、上記培養シートのin vivoにおける細胞動態について検討を加えた。
羊膜は帝王切開時の胎盤より採取した。また歯根膜由来細胞は、抜去した智歯より歯根膜組織を採取し初代培養後、3から4代継代したものを研究に使用した。継代培養した歯根膜由来細胞を羊膜上に播種し、骨分化誘導培地（デキサメタゾン、アスコルビン酸、β-グリセロリン酸含有培地）上で培養を行った。上記にて得られた培養シートを、BALB/cヌードマウス腎被膜下への移植を行い、4週間後に摘出し、H-E染色、アリザリンレッド染色、ならびに免疫染色を行った。骨分化誘導培養を行った羊膜上培養歯根膜由来細胞は、移植4週間後において紡錘形の歯根膜由来細胞が層状に増殖していた。免疫染色像では、間葉系細胞マーカー（vimentin）、骨芽細胞マーカー（bone Gla-protein (osteocalcin)）の発現を認めたが、石灰化物質の形成は認めなかった。
移植後においても歯根膜由来細胞は増殖し、in vivoの環境下においてもその性質を保持していることが示され、羊膜上培養歯根膜由来細胞シートは骨再生能を有した細胞シートである可能性が示された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
骨分化誘導培養を行った羊膜上培養歯根膜由来細胞の実験動物への移植を行い、in vivoでの培養細胞シートの遊走増殖について組織学的、免疫組織化学的解析を行っている。現在までの研究達成度としては、おおむね順調に進展していると考えられる。
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| Strategy for Future Research Activity |
これまでの検討において、羊膜上培養歯根膜由来細胞シートの実験動物移植にて、石灰化物質の存在は認められず、今後、移植方法の検討ならびに移植長期における骨無機質の新生や血管新生等の検討を行っていく必要があると考えている。
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| Causes of Carryover |
年度内に研究試薬の調達が間に合わず、予定額を下回った。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
各種研究試薬、移植実験のための実験動物の購入、ならびに研究成果発表のための旅費・投稿費として使用する予定である。
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[Presentation] In vivo investigation of the osteogenic potential of human periodontal ligament cell sheet cultured on amniotic membrane.2014
Author(s)
Adachi K, Amemiya T, Honjyo K, Ichioka H, Nishigaki M, Oseko F, Yamamoto T, Kanamura N.
Organizer
96th The American Association of Oral and Maxillofacial Surgeons Meeting, Scientific Sessions and Exhibition
Place of Presentation
Hawaii Convention Center, Honolulu, Hawaii, USA.
Year and Date
2014-09-12
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[Presentation] Immunohistochemical study of periosteal-derived cell sheet cultured on amniotic membrane aiming at periodontal tissue regeneration.2014
Author(s)
Amemiya T, Honjyo K, Adachi K, Nishigaki M, Oseko F, Yamamoto T, Kanamura N
Organizer
96th The American Association of Oral and Maxillofacial Surgeons Meeting, Scientific Sessions and Exhibition
Place of Presentation
Hawaii Convention Center, Honolulu, Hawaii, USA.
Year and Date
2014-09-12
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[Presentation] Examination of bone differentiation for human dental pulp-derived cells cultured on amniotic membrane.2014
Author(s)
Honjo K, Yamamoto T, Oseko F, Amemiya T, Kita M, Mazda O, Kanamura N.
Organizer
96th The American Association of Oral and Maxillofacial Surgeons Meeting, Scientific Sessions and Exhibition
Place of Presentation
Hawaii Convention Center, Honolulu, Hawaii, USA.
Year and Date
2014-09-12
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