骨折部におけるDickkopf3の発現と機能解析による骨折治癒機構の解明

2014 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 25870039
• Research Institution: Tohoku University
• Principal Investigator: 森 優 東北大学, 大学病院, 助教 (70634541)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2015-03-31
• Keywords: 骨折修復機構 / 間葉系幹細胞 / Dckkopf3 / 血管新生

Outline of Annual Research Achievements

Dkk3-eGFP、Col3.6GFPcyan、SMAA-RFPchryの3種類のGFPリポーターマウスを交配しtriple colorマウスを作製した。Dkk3は通常は骨膜上に発現していた。靱帯組織、腱組織の付着部においても発現がみられた。骨折後初期では増殖したSMAA陽性細胞においてDkk3あるいはCol3.6との共発現が認められた。骨折部の軟骨形成期では幼若な線維軟骨細胞にはDkk3の発現がみられたが、成熟した軟骨細胞では発現が消失していた。Dkk3は間葉系未分化細胞に発現しており、線維軟骨細胞の細胞マーカーであることが示唆された。Dkk3は骨折修復反応の後期では骨膜上にのみ発現がみられた。Dkk3と血管新生の関連を確認するために、血管基底膜に発現するtype IV collagenの免疫染色を行った。Dkk3とtype IV collagenの発現パターンは全く一致せず、血管新生阻害因子PEDFの免疫染色では、Dkk3と共発現が認められた。以上の結果からDkk3は骨膜上に発現しており、骨折修復反応ではDkk3は線維軟骨細胞に陽性であった。また、線維軟骨細胞のマーカーだけでなく、PEDFとの共発現を認めたことから、Dkk3は血管新生の調節に寄与しており、骨折部の軟骨形成、骨形成の調節に関連している可能性が示唆された。