2014 Fiscal Year Annual Research Report
新規転写共役修復因子UVSSAの精製と生化学的解析
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25870534
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| Research Institution | Nagasaki University |
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Principal Investigator |
郭 朝万 長崎大学, 原爆後障害医療研究所, 客員研究員 (70645283)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | ヌクレオチド除去修復機構 / TC-NER / コケイン症候群 / 紫外線高感受性症候群 / RNAポリメラーゼII / ユビキチン化 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究の目的：転写型RNAポリメラーゼ（RNA polIIo）のユビキチン化メカニズムの解析を通して、UVSSAにより誘発される機能修飾的なユビキチン化やDNA損傷後TC-NER開始反応との関連性及び生理、病態学的な意義を明らかにする。
本年度は、以下の２つの課題を実施した。１）高純度なUVSSA蛋白質やCSA/CSB複合体、RNA polII複合体、各種既知/同定したTC-NER因子及びE3ライゲースを精製し、In vitro再構成実験系(reconstitution)の確立を目指した。RNA polIIoのユビキチン化を再現するため、種々の条件検討を実施した。これらの結果に基づき、UVSSA蛋白質のTC-NERにおける役割のより詳細な解明に取り組んだ。２）細胞イメージング技術、生化学技術などを用いて、DNA損傷処理後の正常細胞、UVSS細胞、CS細胞におけるRNA polIIoの分解・滞留等を詳細に調査した。FRAP法及びFRET法を用いて、RNA polIIoバックトラッキングの分子ダイナミクスの解析を試みた結果、損傷DNA鎖上におけるRNA polIIoの滞留時間が、正常細胞、CS細胞、UVSS細胞において異なる可能性が示された。今後、RNA polIIoの損傷部位における停止と転写阻害をより詳細に検証し、UVSSとCSの病態の違いとの関連を明らかにする。
TC-NER修復機構には、まだ同定されていない関連因子が多数存在すると予想される。今後も引き続き、UVSSAと相互作用する蛋白質群、及びこれらの蛋白質群と相互作用する因子群について、そのネットワークを解析し、UVSSAの損傷修復機能の制御機構の全体像を明らかにしていく。
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[Journal Article] Preparation of monoPEGylated Cyanovirin-N’s derivative and its anti-influenza A virus bioactivity in vitro and in vivo.2015
Author(s)
Chongchao Wu, Wei Chen, Jia Chen, Bo Han, Zhou Peng, Feng Ge, Bo Wei, Mingxian Liu, Meiying Zhang, Chuiwen Qian, Zhibo Hou, Ge Liu, Chaowan Guo, Yifei Wang, Kaio Kitazato, Guoying Yu, Chunbin Zou, Sheng Xiong.
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Journal Title
Journal of Biochemistry
Volume: 157
Pages: 1-10
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Linker-Extended Native Cyanovirin-N Facilitates PEGylation and Potently Inhibits HIV-1 by Targeting the Glycan Ligand.2014
Author(s)
Jia Chen*, Dane Huang*, Wei Chen*, Chaowan Guo*, Bo Wei, Chongchao Wu, Zhou Peng, Jun Fan, Zhibo Hou, Yongsheng Fang, Yifei Wang, Kaio Kitazato, Guoying Yu, Chunbin Zou, Chuiwen Qian and Sheng Xiong.*equal contribution.
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Journal Title
PLOS one
Volume: 9
Pages: e86455
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Effect of antioxidants on the quality and genomic stability of induced pluripotent stem cells2014
Author(s)
Lan Luo, Miho Kawakatsu, Chaowan Guo, Yoshishige Urata, Wenjing Huang, Haytham Ali, Hanako Doi, Yuriko Kitajima, Takayuki Tanaka, Shinji Goto, Yusuke Ono, Hongbo Xin, Kimikazu Hamano and Taosheng Li.
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Journal Title
Scientific Reports
Volume: 4
Pages: 1-7
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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