全身性強皮症の病態におけるmicroRNA let-7aの関与の検討

2014 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 25870555
• Research Institution: Kumamoto University
• Principal Investigator: 牧野 雄成 熊本大学, 医学部附属病院, 非常勤診療医師 (00433037)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2015-03-31
• Keywords: 全身性強皮症 / 皮膚線維芽細胞 / コラーゲン / microRNA / let-7a / 限局性強皮症 / 血清microRNA / extracellular matrix

Outline of Annual Research Achievements

全身性強皮症の硬化皮膚では、主に皮膚線維芽細胞が産生するⅠ型コラーゲンの過剰な沈着が生じているが、その機序は不明である。本研究では、microRNA let-7aがこの過剰なⅠ型コラーゲンに産生に関与しているか検討した。microRNAアレイにより、microRNA let-7aが全身性強皮症の皮膚組織で低下していることを見出し、この低下が皮膚線維芽細胞において生じていることをreal-time PCR法やIn situ hybridization法で確認した。また血清中のlet-7a量についても検討し、全身性強皮症の硬化の強い患者では、血清let-7a量は減少傾向であった。次にlet-7aが皮膚線維芽細胞において実際Ⅰ型コラーゲン蛋白量を変化させうるのか検討した。合成したlet-7aを線維芽細胞に導入するとⅠ型コラーゲン量は減少し、逆にlet-7aの阻害剤を導入するとⅠ型コラーゲン量は増加した。以上より強皮症の皮膚線維芽細胞におけるlet-7a低下が、過剰なコラーゲン産生に関与していると考えられた。次に強皮症の硬化皮膚でlet-7aを増やすことができれば硬化が改善するのではと推測し、ブレオマイシン硬化皮膚マウスモデルで検討した。ブレオマイシンを局所注射することで誘導した硬化皮膚においてもlet-7aは減少していた。アテロコラーゲン製剤と合成let-7aを混合し、マウス腹腔内に注射すると、少なくとも3日間は皮膚におけるlet-7a量が増加することを見出した。このlet-7a腹腔内注射を行いながらブレオマイシン局所注射とlet-7a腹腔内注射を行うと皮膚硬化は軽減していた。最終年度ではlet-7aが強皮症皮膚線維芽細胞で低下している機序について検討を行ったが、現時点で有意義な結果は得られておらず今後の検討課題である。

Research Products

• [Journal Article] Serum levels of soluble carbonic anhydrase IX are decreased in patients with diffuse cutaneous systemic sclerosis compared to those with limited cutaneous systemic sclerosis (2014)
  • Author(s): Makino K, Jinnin M, Makino T, Kajihara I, Fukushima S, Inoue Y, Ihn H
  • Journal Title: Biosci Trends. Volume: 8 Pages: 144-148
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Knockout of endothelial cell-derived endothelin-1 attenuates skin fibrosis but accelerates cutaneous wound healing (2014)
  • Author(s): Makino K, Jinnin M, Aoi J, Kajihara I, Makino T, Fukushima S, Sakai K, Nakayama K, Emoto N, Yanagisawa M, Ihn H
  • Journal Title: PLoS One. Volume: 22 Pages: e97972
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Down-regulation of microRNA-196a in the sera and involved skin of localized scleroderma patients (2014)
  • Author(s): Makino T, Jinnin M, Etoh M, Yamane K, Kajihara I, Makino K, Ichihara A, Igata T, Sakai K, Fukushima S, Ihn H
  • Journal Title: Eur J Dermatol. Volume: 24 Pages: 470-6
  • DOI: 10.1684/ejd.2014.2384
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] The expression profile of the toll-like receptor family in scleroderma dermal fibroblasts (2014)
  • Author(s): Sakoguchi A, Nakayama W, Jinnin M, Wang Z, Yamane K, Aoi J, Makino K, Kajihara I, Ichihara A, Makino T, Fukushima S, Sakai K, Inoue Y, Ihn H
  • Journal Title: Clin Exp Rheumatol. Volume: 32 Pages: S-4-9
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Immunoglobulin G4-related disease in a psoriasis vulgaris patient treated with ustekinumab (2014)
  • Author(s): Kajihara I, Makino K, Ichihara A, Fukushima S, Jinnin M, Hirooka S, Kojima K, Kourogi H, Ihn H
  • Journal Title: J Dermatol. Volume: 41 Pages: 670-1
  • DOI: 10.1111/1346-8138.12528.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] An increased CCL22 expression in psoriatic skin predicts a good response to infliximab therapy (2014)
  • Author(s): Kusumoto S, Kajihara I, Nagamoto E, Makino K, Ichihara A, Aoi J, Johno T, Makino T, Fukushima S, Jinnin M, Ihn H
  • Journal Title: Br J Dermatol. Volume: 171 Pages: 1259-1261
  • DOI: 10.1111/bjd.13091
  • Peer Reviewed