2015 Fiscal Year Annual Research Report
新規アンジオテンシン受容体ワクチンの開発とその応用性の検討
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25870715
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| Research Institution | Keio University |
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Principal Investigator |
畔上 達彦 慶應義塾大学, 医学部, 助教 (60573376)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 高血圧 / ワクチン / 粘膜免疫 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究はアンジオテンシンII 1型受容体（AT1）に対する経口・経鼻投与型ワクチンの作成を目的とし、平成25年度にワクチン抗原を作成、26年度に降圧効果を検討、27年度に高血圧性腎症，糖尿病性腎症に対する効果を評価する予定であった。平成26年度終了時点で、経口・経鼻ワクチンともに抗原の作成が終了しておらず、27年度では両抗原の作成を終え、免疫原性あるいは降圧効果を検討するにとどまった。
経口型AT1ワクチンに関しては、アグロバクテリウムを用いてコメ種子にAT1部分配列とコレラ毒素Bサブユニット（CTB）とのキメラ蛋白を発現させ、western blottingにより蛋白発現を確認した。次に、このコメ種子をフロイントアジュバントとともに、高血圧自然発症ラット（SHR）に皮下注射したところ、CTBに対する特異的IgG抗体が誘導されたが、AT1に対する特異的抗体は誘導されなかった。本研究では、コメ種子内にAT1-CTB蛋白を発現させることに成功したが、AT1部分配列に対する抗原性は乏しいと結論付けた。
経鼻型AT1ワクチンに関しては、AT1部分配列ペプチドを合成し、キャリア蛋白として肺炎球菌表面抗原（PspA）を、マレイミド基を介して化学的に結合させた（AT1-PspA）。AT1-PspAを各種アジュバントと混合し、皮下注射したところ、AT1に対する特異的IgG抗体が誘導された。次いで、経鼻投与で各種アジュバント，cCHPナノゲルの有無による免疫原性（抗体価）の検討を行ったところ、AT1-PspA 10 ugとcyclic di-GMPアジュバント 50 ugを混合し、cCHPナノゲルに内包したものが、最も高い抗体価を示した。この条件で、AT1-PspAを、雄SHRに4-8週齢にかけて計5回（週1回）経鼻免疫したところ、降圧効果が確認された。今後、降圧の機序を確認する予定である。
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